茯砖茶中氯氰菊酯和3-苯氧基苯甲酸降解“金花菌”的筛选及其降解特性的研究

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拟除虫菊酯类农药(PY)是现今农业生产使用较为广泛的一类杀虫剂,且具有一定的发展潜力。但长期使用会造成农产品和环境中大量残留,严重威胁着人类的健康发展。不仅如此,拟除虫菊酯类农药在降解过程中还会产生其它污染物,造成环境的二次污染,严重影响现代农业的可持续发展。微生物降解是环境中消除农药残留的主要方式,具有高效、环保等特点,已成为解决农药残留问题的研究热点。本研究以拟除虫菊酯类农药中的氯氰菊酯为代表作为研究对象,目前氯氰菊酯降解菌多以细菌为主,且来源单一,菌株本身安全问题难以保障。关于降解途径的研究也不全面。因此,本研究以茯砖茶作为菌源,筛选能够同时降解氯氰菊酯及其中间降解产物一3-苯氧基苯甲酸的“金花菌”,并研究其降解特性及降解途径,为其应用于环境和食品中提供菌种资源及理论依据。1.氯氰菊酯降解“金花菌”的筛选及其鉴定 以茯砖茶为菌源,分离纯化出20株“金花菌”。其中分离菌株ET1在PD中培养7d对50 mg/L氯氰菊酯的降解率可达51.4%,且分离菌株ET1可在7d内完全降解PD中100 mg/L的3-PBA。根据其形态特征和ITS序列分析(GenBank Accession No.KF317836),将其鉴定为冠突散囊菌(Eurotium cristatum) o2.冠突散囊菌ET1对氯氰菊酯和3-PBA的降解特性动力学研究表明,菌株ET1降解氯氰菊酯和3-PBA的过程符合一级动力学方程。在氯氰菊酯质量浓度、温度和pH的测试范围内,氯氰菊酯半衰期为3.38-11.24 d,该反应的速率受底物浓度影响较大,受温度和pH的影响不大。在3-PBA质量浓度、温度和pH的测试范围内,3-PBA半衰期为1.71-3.23d,远远低于其自然降解半衰期(180d),且该反应的速率受pH影响较大,受3-PBA质量浓度和温度的影响相对较小。3.冠突散囊菌ET1降解氯氰菊酯途径利用HPLC法检测氯氰菊酯产物特征峰以及GC-MS确认中间产物,推断冠突散囊菌ET1将氯氰菊酯降解为3-PBA及3-PBA的进一步降解途径。其推断的降解途径为:氯氰菊酯在酯酶的作用下使其中间酯键断裂,水解生成二氯菊酸和α-氰基-3-苯氧基苄醇;α-氰基-3-苯氧基苄醇自发转化生成3-苯氧基苯甲醛,3-苯氧基苯甲醛进一步氧化生成3-苯氧基苯甲酸;3-苯氧基苯甲酸氧化生成苯酚和原儿茶酸,原儿茶酸可被进一步降解生成直链烯酸;苯酚在反应过程中生成儿茶酚,儿茶酚的苯环断裂生成直链烯酸;直链烯酸通过其它代谢途径被彻底降解。本研究不仅推断了金花菌对氯氰菊酯的降解途径,同时筛选的金花菌为有益菌,为其应用于食品和环境中氯氰菊酯残留消除提供了数据参考和菌株资源,具有一定的理论意义和应用价值。
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