小麦β-1,3-葡聚糖酶的诱导、纯化与抗菌活性

来源 :山东农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiaohai_wl
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β-1,3-葡聚糖酶是植物抗真菌病的重要抗性物质之一,可由多种生物因子和非生物因子诱导产生,能催化真菌细胞壁的重要成分—β-1,3以-葡聚糖和β-1,3-1,6葡聚糖的水解,水解的寡糖产物是植物防御反应的重要激发子。本研究三个小麦品种331、抗倒680、鲁麦23经氯化汞、水杨酸或核黄素处理后,叶片中的β-1,3-葡聚糖酶活性均有不同程度的升高。在实验的处理与品种之中,氯化汞处理品种331 24 h对β-1,3-葡聚糖酶活性的诱导作用最强。因此取用氯化汞处理24 h的331小麦叶片加液氮研磨,得到粗酶液。将粗酶液经硫酸铵分级沉淀、Phenyl-Sepharose Fast Flow疏水层析、DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子交换层析和Sephacryl S-100分子筛层析,得到了SDS-PAGE凝胶电泳谱带单一的β-1,3-葡聚糖酶样品。经SDS-PAGE(12%)和凝胶过滤层析,测得其分子量约为52.0~53.6kD。抗菌试验测定显示,纯化的β-1,3-葡聚糖酶样品对供试的四种病原真菌的生长、孢子萌发或芽管伸长有一定程度的抑制作用。本研究还对纯化的β-1,3-葡聚糖酶的基本性质进行了测定,结果表明:纯化的β-1,3-葡聚糖酶最适温度为35℃,最适PH值范围为4.5~5.0之间。Na2+、K+、Ba2+和Mn2+等对β-1,3-葡聚糖酶有一定的激活作用,Fe2+、Ag+、Cu2+和Zn2+等对该酶有强烈的抑制作用。
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