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目的研究PCBP2在大鼠坐骨神经损伤过程中的表达变化、作用,分析PCBP2与雪旺细胞增殖之间的关系,探讨PCBP2在周围神经损伤和修复过程中的作用机制,也为周围神经损伤的治疗提供依据。方法1.选用健康成年雄性SD大鼠(220-275 g左右)54只,构建大鼠坐骨神经夹伤模型,根据损伤时间的不同,将大鼠随机分为9组:正常组(假手术组)、6 h、12 h、1 d、3 d、5 d、1 w、2 w和4w。每组6只,其中3只用于组织切片,3只用于提取神经组织蛋白,运用Western Blot方法测定不同损伤时间点PCBP2的表达变化,初步确定PCBP2的表达在周围神经损伤后的变化趋势。2.通过免疫组化的方法观察PCBP2在周围神经损伤后相应组织中的表达情况,通过免疫荧光双标方法分析PCBP2在坐骨神经中的分布和细胞定位。3.筛选PCBP2干扰的雪旺细胞稳转株,在稳转株中验证干扰PCBP2后是否会影响FHL3、p21信号的表达。运用流式细胞技术及CCK-8分析干扰PCBP2后对雪旺细胞增殖周期的影响。结果1.Western bolt结果显示PCBP2蛋白水平在神经损伤后3d开始上调,在7d达到高峰,在损伤后4w恢复到正常水平。2.免疫组化结果表明坐骨神经夹伤后,神经组织中的PCBP2阳性率增强;免疫荧光双标分析表明在坐骨神经夹伤后,PCBP2主要表达于S100标记的雪旺细胞中,与NF200标记的轴突没有共定位。此外,PCBP2与雪旺细胞增殖标记物PCNA也有共定位。3.TNF-α诱导的雪旺细胞增殖模型中,PCBP2的表达逐渐增加,与细胞增殖标记物PCNA的表达趋势一致,但FHL3及p21的表达逐渐降低。流式细胞分析技术及CCK-8结果表明:干预PCBP2的表达能抑制雪旺细胞的增殖。4.雪旺细胞中干预PCBP2的表达后,FHL3及p21的表达增加,同时干预FHL3的表达后,p21的表达减少,并且免疫荧光双标实验表明PCBP2与FHL3及p21有共同的定位。结论1.PCBP2的表达在急性损伤后3-5d明显升高,4w恢复到正常水平。其表达主要定位在雪旺细胞中,在轴突中表达量较少,且与雪旺细胞的增殖相关。2.PCBP2调节雪旺细胞的增殖过程可能通过FHL3-p21信号通路完成。