本文观察准分子激光角膜磨镶术(LASIK)术后角膜瓣上神经的修复情况，探讨LASIK术后干眼症的发生与角膜神经损伤的关系；应用神经生长因子(NGF)结膜下注射，观察对兔角膜神经损伤后的神经修复、再生的促进作用以及角膜知觉的恢复情况；为NGF在治疗LASIK术后干眼症的临床应用提供实验依据。 研究方法： 1.动物模型制备：采用新西兰白兔66只，6只作为正常对照，其余60只随机编号，分为单号组、双号组。单号组以-2.00DS、双号组以-5.00DS进行准分子激光角膜切削手术，其余参数相同。手术按常规步骤进行，术毕两组均左眼结膜下注射NGF2000u，右眼注射生理盐水0.2ml。上述治疗每周两次，于术后1周、2周、4周，3月、6月分别处死。 2.观察项目：术前，术后1周、2周、4周，3个月、6个月，行共聚焦生物显微镜观察活体兔双眼角膜瓣中央部、切削区角膜神经纤维情况，术前为正常对照。每时间点气体栓塞分别处死6只兔子，摘除眼球后，将角膜自上皮面撕开，实验动物角膜瓣为一层，采用乙酰胆碱酯酶染色法观察角膜胆碱能神经。以上二者按设计方法记录每个视野神经纤维数目。 以Cochet-Bonnet角膜触觉测定法在上述相同时间测量角膜知觉，角膜中央、角膜瓣内边缘上方、颞侧、下方、鼻侧分别记录为1、2、3、4、5点，分别记录左、右眼各角膜点、各时间点测定值，以检查角膜神经功能，术前数据作为正常对照进行统计学分析、处理。 研究结果： 1.角膜神经形态、数量观察：通过角膜共聚焦显微镜和光学显微镜观察发现，NGF治疗组术后1周、2周、4周时角膜瓣上神经纤维的数量明显高于对照组，二者有非常显著性差异(P＜0.001)。1周时共聚焦显微镜观察-2.00DS治疗组和对照组神经纤维分别是2.05±1.51、0.79±0.92，-5.00DS治疗组和对照组分别是2.19±1.82、0.70±0.87，光学显微镜观察为9.87±2.45、2.73±0.96、6.67±1.96、3.00±0.63。此后，随术后时间延长神经纤维数目均逐渐增多，以治疗组更明显。术后4周时共聚焦显微镜观察-2.00DS治疗组和对照组神经纤维分别是27.18±5.86、18.23±4.43，-5.00DS治疗组和对照组分别是26.79±5.56、18.83±4.12，光学显微镜观察为21.83±3.25、15.33±2.16、20.9±2.96、16.4±1.63。与对照组相比，治疗组神经纤维形态更早趋于正常，4周时可见浅层、深层出现连接。治疗组3个月时上皮下、浅基质内新生神经纤维连接成网，其部分神经形态、走行趋于正常；对照组3月时呈过渡增生，纤细、弯曲、分支多、密集，与治疗组比较对照组神经纤维数量略少，但统计学处理无差异。6月时治疗组形态、数量接近正常，对照组趋于正常，数量较多，呈重新分布状。 另外，共聚焦显微镜观察显示，不同的切削深度术后各时间点神经纤维数量均无差异，但-2.00DS比-5.00DS神经纤维形态更早趋于正常。 2.角膜神经功能检查：术后1周时角膜中央敏感度-2.00DSNGF组和对照组分别是2.875±2.496mm、0.267±0.458mm，-5.00DSNGF组和对照组分别是1.976±5.27mm、0.103±0.467mm，经统计学处理二者无差异。术后2周、4周随时间延长逐渐恢复，但NGF组明显好于对照组，出现显著性差异。术后3月时-2.00DSNGF组和对照组分别是27.561±2.078mm、22.431±2.457mm，-5.00DSNGF组和对照组分别是23.972±2.449mm、17.403±1.817mm，治疗组与对照组比较、-2.00DS组与-5.00DS组比较均呈显著性差异。术后6月时NGF组和对照组中央部角膜知觉均接近正常。对术后同一时间同一只眼而言，周边部角膜知觉好于中央部，与共焦显微镜观察一致。 研究结论：NGF可以明显缩短LASIK术后角膜神经损伤的修复时间，促进角膜神经的再生，提高角膜的敏感度，减少LASIK术后干眼的发生。