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目的:本研究以小鼠肺癌细胞系Lewis荷瘤模型小鼠和人肺癌细胞系A549为研究对象,观察青藤碱的抗肺癌作用及对α 7nAChR表达的影响。体外实验分析青藤碱对肺癌细胞的抗增殖作用与nAChR及MAPK通路活化的关系;进一步探讨青藤碱下调肺癌细胞中α 7nAChR表达的调控机制。方法:1.青藤碱对肺癌荷瘤模型小鼠影响:建立小鼠肺癌细胞Lewis细胞培养体系,检测青藤碱对Lewis细胞增殖的影响。建立Lewis细胞C57BL/6小鼠荷瘤模型7d后分组:青藤碱高剂量组(160mg/kg)、青藤碱低剂量组(80mg/kg)、顺铂组(1mg/kg)、NNK组(1.5mg/kg),腹腔注射给药14d后检测移植瘤的瘤重;E1ISA法检测小鼠血清中TGF-β、VEGF含量;Western blot法检测移植瘤及肺组织中α 7nAChR表达的变化。2.青藤碱体外抑制A549细胞增殖机制:MTT检测不同浓度青藤碱对人肺癌细胞系A549增殖的影响,以NNK、Ber作为对照观察,并进一步观察N型乙酰胆碱受体拮抗剂美加明和M型乙酰胆碱受体拮抗剂阿托品对青藤碱抗A549细胞增殖作用的影响。Western blot法检测青藤碱、NNK、Ber对人肺癌细胞系A549中ERK1/2、p-ERK1/2表达的影响。3.青藤碱对α 7nAChR表达的调控机制:RT-PCR、Weern blot法检测青藤碱、NNK、Ber对人肺癌细胞系A549中α 7nAChR表达的影响。RT-PCR法、Western blot法检测青藤碱对人肺癌细胞系A549中Egr-1、SP-1、TTF-1表达的影响。结果:1.青藤碱抑制肺癌荷瘤模型小鼠:青藤碱抑制小鼠肺癌Lewis细胞增殖,抑制作用随着剂量的增加而增强。青藤碱体内抑制肺癌荷瘤模型移植瘤的瘤重,降低血清中TGF-β、VEGF含量;顺铂抑制肺癌荷瘤模型移植瘤的瘤重,降低血清中TGF-β、VEGF含量;NNK能促进肺癌荷瘤模型移植瘤组织的瘤重,增加血清中TGF-β、VEGF含量。青藤碱青藤碱降低肺癌荷瘤模型移植瘤和肺组织中α 7nAChR蛋白水平;顺铂对肺癌荷瘤模型移植瘤和肺组织中α 7nAChR蛋白水平无明显影响;NNK能增加肺癌荷瘤模型移植瘤和肺组织中α 7nAChR蛋白水平。2.青藤碱可能通过作用于nAChR抑制肺癌细胞增殖,并抑制MAPK通路中ERK活化水平:青藤碱体外抑制人肺癌细胞A549增殖,该作用被美加明拮抗,不能被阿托品拮抗;Ber抑制人肺癌细胞A549增殖,该作用不能被美加明、阿托品拮抗;NNK促进人肺癌细胞A549增殖,该作用能被美加明拮抗,不能被阿托品拮抗;ACh促进肺癌细胞A549增殖,该作用能被阿托品拮抗,不能被美加明拮抗。青藤碱降低人肺癌细胞A549中p-ERK 1/2与ERK1/2比值,小檗碱对人肺癌细胞A549中p-ERK 1/2与ERK1/2比值无明显影响,NNK升高p-ERK1/2与ERK1/2比值。3.青藤碱下调α 7nAChR表达可能与增加肺癌细胞中Egr-1水平,降低SP-1、TTF-1水平有关:青藤碱降低人肺癌细胞A549中α 7nAChR mRNA和蛋白水平,小檗碱对人肺癌细胞A549中α 7nAChR mRNA和蛋白水平无明显影响,NNK增加α 7nAChR mRNA和蛋白水平。青藤碱能增加人肺癌细胞A549中Egr-1 mRNA和蛋白水平,降低SP-1、TTF-1 mRNA和蛋白水平,小檗碱对人肺癌细胞A549中Egr-1、SP-1、TTF-1mRNA和蛋白水平无明显影响,NNK能降低人肺癌细胞A549中Egr-1 mRNA和蛋白水平,增加SP-1、TTF-1 mRNA和蛋白水平。结论:青藤碱对肺癌荷瘤小鼠具有抗肺癌作用,并下调α 7nAChR的表达。青藤碱可能通过作用于nAChR,发挥抗肺癌细胞增殖的作用,并抑制MAPK通路中ERK1/2活化。青藤碱下调肺癌细胞中α 7nAChR表达可能与其上调Egr-1,下调SP-1和TTF-1有关。