中国明对虾卵黄蛋白原的cDNA克隆及表达特征研究

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卵黄蛋白原(Vitellogenin,Vg)是卵黄蛋白(vitellin,Vn)的前体。脊椎动物和昆虫的Vg分子得到了广泛研究,但对虾Vg基因的研究报道相对较少。中国明对虾是我国重要的经济养殖品种。本文通过同源克隆和RACE等方法从成熟中国明对虾卵巢中克隆到了一条Vg cDNA序列。全长7956 bp,含有一个7761 bp的开放阅读框(ORF),编码2587个氨基酸残基。推导的氨基酸序列与其他已知甲壳动物Vg具有80—95%的相似性(identity),序列比对和聚类分析表明中国明对虾Vg与墨吉明对虾Vg氨基酸序列相似性最高(95%)。SingalP程序预测Vg前体N末端含有18个氨基酸残基的信号肽。其余2569个氨基酸中含有一个RXR分裂位点,此位点能被枯草杆菌样蛋白内切酶(subtilisin-like endoproteases)所识别并裂解。推导的Vg理论分子量是281823u,理论等电点pI为6.13,是一种酸性蛋白,带正电荷氨基酸残基(Arg+Lys)总数283,带负电荷氨基酸残基(Asp+Glu)总数为311。氨基酸含量分析显示,Vg蛋白含有较多的Ala(11.56%)、Glu(8.99%)、Val(8.52%)和Ile(7.12%)。RT-PCR方法检测到Vg基因同时存在于雌性和雄性对虾基因组中,但其转录只发生在卵黄形成期的雌性对虾的卵巢和肝胰腺中。
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