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microRNA (miRNA)是一类约21-25个核苷酸的单链非编码RNA,其序列在真核生物中高度保守。miRNA由基因组序列编码,通过直接降解靶基因mRNA或抑制其蛋白翻译,在转录后水平进行基因表达调控。近期大量研究表明miRNA在恶性肿瘤的发生、发展及演变过程中发挥重要作用,它们可作为一种新型的分子靶标在肿瘤的诊断和治疗中具有广泛的应用前景。本实验室前期已用活细胞工作站采用创伤修复实验筛选人类646个miRNA,并进行Transwell实验验证,鉴定出11个miRNA分子对肝癌细胞的迁移具有重要调控作用。通过文献分析,结合本实验室已有的肝癌全基因组SNP6.0芯片数据,并进行功能验证,确定miR-525-3p为候选研究对象,并对其在肝癌细胞迁移与侵袭中的作用及机制进行系统深入的研究。首先,实时荧光定量PCR检测发现miR-525-3p在肝癌组织样本中普遍上调；过表达miR-525-3p能促进肝癌细胞的迁移与侵袭能力；通过生物信息学分析结合实时荧光定量PCR验证,以及荧光素酶,western blot等分析,确定Zinc finger protein 395(ZNF395)是miR-525-3p下游直接靶基因,miR-525-3p可通过与ZNF395 3’末端非翻译区(3’untranslated reagion,3’UTR)结合抑制其表达。其次,进一步研究发现在肝癌组织中ZNF395表达普遍下调；过表达ZNF395能显著抑制肝癌细胞迁移与侵袭能力,干扰其表达则促进肝癌细胞迁移与侵袭,提示ZNF395在肝癌中可作为转移抑制基因。功能回复实验结果提示miR-525-3p可通过下调ZNF395表达而促进肝癌细胞的迁移与侵袭。综上所述,我们发现miR-525-3p在肝癌组织中表达普遍上调,并显著促进肝癌细胞的迁移与侵袭；ZNF395在肝癌组织中的表达普遍下调,并显著抑制肝癌细胞的迁移及侵袭；miR-525-3p在转录后水平调控ZNF395的表达,ZNF395是miR-525-3p的下游功能靶基因。这些发现为肝癌细胞迁移与侵袭提供了一个新的分子机制,为肝癌转移治疗提供了一个新的候选分子靶标。