本论文对电化学发光（ECL）法、电化学发光免疫分析（ECLIA）法作了系统的阐述。因具有巨大表面积和良好的生物相容性，氧化石墨烯表面可键合纳米颗粒、抗体、DNA、酶等标记物，得到的多功能化氧化石墨烯是构建免疫传感器的理想基材。本研究工作将ECLIA法与多功能化氧化石墨烯结合，开发了一种新型“电极内”“法拉第笼式”ECL免疫检测模式，构建了一系列 ECL免疫传感器，实现对低浓度的肿瘤标志物及海洋致病菌的高灵敏检测。　　1、一步制备糖类抗原19-9电化学发光免疫传感器　　基于多功能化氧化石墨烯一步制备电化学发光（ECL）免疫传感器。N-(4-氨基丁基)-N-乙基异鲁米诺（ABEI）与糖类抗原19-9抗体（anti-CA19-9）同时化学键合到磁性氧化石墨烯表面得到多功能化氧化石墨烯，其中 ABEI作为电化学发光体，anti-CA19-9用于捕获CA19-9。由于具有良好导电性及磁性，磁性氧化石墨烯不仅使所有标记至氧化石墨烯（GO）的ABEI都具有电化学活性，也可实现传感器的一步制备。结果显示，传感器的ECL强度与CA19-9浓度的对数在0.001-5U/mL范围内呈现良好的线性关系，检测限为0.0005U/mL。该ECL免疫传感器具有良好的特异性、稳定性、重现性、再生性和应用能力，为功能化氧化石墨烯材料在ECL免疫分析领域中的应用开拓了新思路。　　2、副溶血弧菌免标记电化学发光免疫传感器　　基于多功能化氧化石墨烯，开发了一种超快、超灵敏检测海水及海产品中副溶血弧菌（VP）的免标记ECL传感器。多功能化氧化石墨烯，由N-(4-氨基丁基)-N-乙基异鲁米诺（ABEI）及VP抗体同时键合至磁性氧化石墨烯（nanoFe3O4@GO）表面得到，而ABEI与VP抗体分别作为该传感器的电化学发光体及VP捕获者。由于nanoFe3O4@GO为二维结构，且具有良好的导电性，可使所有固定至GO表面的ABEI发射有效的ECL信号，因此，提高了检测灵敏度。在最优条件下，ECL信号强度值与VP浓度的对数，在10-108CFU/mL浓度范围内存在良好的线性关系，对于海水及海产品实际样品检测，检测限分别为5CFU/mL及5g/mL。实验结果表明，该传感器具有良好的特异性、稳定性、再生性，此外，采用加标回收方法，还可实现海水及海产品中VP的快速检测，回收率在94.4-112.0％之间，RSD在4.1-11.7%之间。因此，该传感器在实际应用中具有潜在的应用价值。　　3、超灵敏“电极内”“法拉第笼式”电化学发光免疫分析法　　首次报道了一种新概念的“电极内”“法拉第笼式”电化学发光免疫分析（ECLIA）模式，用于超灵敏检测神经降压素（NT）。在本方法中，使用了两种多功能化氧化石墨烯（GO）材料，分别为捕获抗体（Ab1）-Fe3O4纳米粒子@GO，简称捕获单元，检测抗体（Ab2）＆N-（4-氨基丁基）-N-乙基异鲁米诺（ABEI）@GO，简称信号单元。其中，信号单元可有效得扩展电极表面的赫姆霍兹面（OHP），使得检测灵敏度提高了近1000倍。　　4、“法拉第笼式”电化学免疫传感器检测创伤弧菌的应用研究　　基于多功能化氧化石墨烯开发了一种新型“法拉第笼式”电化学发光免疫（ECLIA）方法，用于检测低浓度创伤弧菌（VV）。氧化石墨烯具有大优良的性质，如表面积大，含有丰富的基团等，可标记大量的电化学发光体双（2，2-二吡啶）-（5-氨基邻二氮杂菲）双（六氟磷酸）钌（Ru-NH2），并使所有电化学发光体发射有效ECL信号，因此，提高了检测灵敏度。在最优条件下，传感器的ECL强度值与VV浓度的对数在4-4×108CFU/mL范围内呈现良好的线性关系，检测限为1CFU/mL。此外，本传感器还具有高的特异性、稳定性以及再生性，为致病菌检测提供了一种新思路。