糙叶败酱中环烯醚萜类化学成分的分离分析

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败酱始载于《神农本草经》,列为中品,具有清热解毒、祛瘀排脓、活血化瘀、镇静安神之功效。作为传统中药败酱使用的败酱科败酱属植物主要有黄花败酱、白花败酱、糙叶败酱、异叶败酱等。由于该属植物具有抑菌、抗肿瘤、止血、免疫调节及镇静等多方面的药理作用而备受关注。本文首先归纳总结了国内外有关败酱属的研究成果,对其资源分布、化学成分及药理活性进行了综述。其次以糙叶败酱(Patrinia scabra Bunge)为研究对象,重点针对其环烯醚萜类(iridoids)化学成分进行了分离分析和生物活性研究,具体工作如下:(1)采用硅胶及Sephadex LH-20凝胶等色谱技术对糙叶败酱中的环烯醚萜类成分进行分离,然后根据化合物的理化性质、波谱数据及相关文献进行结构鉴定,结果从95%乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部位共分离得到5个单体化合物,鉴定出其中4个,分别是:1,3-二甲氧基-4,7-二甲基-八氢-环戊二烯并吡喃-6,7-二醇,异白花败酱醇,5-O-阿魏酰奎宁酸,黄花败酱醇。其中1,3-二甲氧基-4,7-二甲基-八氢-环戊二烯并吡喃-6,7-二醇和异白花败酱醇为新的环烯醚萜苷元,5-O-阿魏酰奎宁酸是首次从该植物中分离得到。(2)以分离得到的新环烯醚萜苷元异白花败酱醇为对照品,采用薄层色谱(TLC)和高效液相色谱(HPLC)技术,建立了糙叶败酱中异白花败酱醇的定性定量分析方法。结果表明,糙叶败酱药材中异白花败酱醇的TLC鉴别特征明显,专属性好;异白花败酱醇在0.2~1.2mg/mL浓度范围内与峰面积积分值呈良好线性关系(r=0.9997),平均加样回收率为98.8%,RSD=2.84%(n=9)。所建立的分析方法准确、可靠,可用于糙叶败酱的质量控制。(3)采用MTT法,对异白花败酱醇的抗肿瘤活性进行体外筛选。结果显示,异白花败酱醇在1×10-6~1×10-2mol/L浓度范围内对人结肠癌细胞株SW480和人宫颈癌细胞株HeLa有较弱的抑制作用,对人肝癌细胞株HepG2、人乳腺癌细胞株MCF-7无细胞增殖抑制作用。(4)采用纸片法药敏试验,对异白花败酱醇的抑菌效果进行评价。结果表明,异白花败酱醇浓度为10mg/mL和20mg/mL时对测试的四种病原微生物枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、白色念珠菌均无抑制作用。环烯醚萜类(iridoids)是糙叶败酱的主要成分之一,具有广泛的生物学活性,包括抗肿瘤、抗菌、抗病毒、抗炎、免疫增强等作用。本论文的研究结果丰富了败酱属植物中天然产物数据库,为糙叶败酱活性成分的阐明、植物化学分类学提供了重要的参考。
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