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目的:
目前,绝大多数药物后处理对心肌缺血再灌注损伤的实验研究都是在正常动物模型上进行的。然而实际上临床心肌缺血的患者通常伴随有其他病理状况,例如高胆固醇血症。因此本实验针对高胆固醇血症的动物进行药物后处理研究,评价α7烟碱能乙酰胆碱受体激动剂PNU282987后处理对大鼠高胆固醇血症基础上发生的心肌缺血再灌注损伤的影响及其可能的机制。
方法:
(1)建立高胆固醇血症大鼠模型:将健康、雄性Sprague-Dawley大鼠(190-220g)喂食高胆固醇饮食8周以构建高胆固醇血症模型。另外取同源大鼠喂食正常饮食作为对照。采用自动生化分析仪分别测定各组大鼠饲养前和8周末的血清总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白和低密度脂蛋白含量来鉴定高胆固醇血症大鼠模型是否建立成功。
(2)采用结扎冠状动脉左前降支30min,再灌注180min来建立在体心肌缺血-再灌注损伤模型。采用再灌注前腹腔注射PNU2829872.4mg/kg来制备药物后处理模型。再灌注结束后取血样,应用酶联免疫吸附实验的方法分别测定血清心肌肌钙蛋白I、血清肌酸激酶心肌型同工酶的浓度。然后通过伊文思蓝和氯化三苯基四氮唑双重染色检测心肌梗死面积。
(3)按照第二部分进行试验,通过酶联免疫吸附实验的方法分别检测各组血清炎症因子:肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、高迁移率组蛋白1(HMGB1)、血清白介素-6(IL-6)的浓度。
结果:
(1)与正常饮食喂养组相比,高胆固醇饮食喂养组大鼠血清总胆固醇含量、甘油三酯和低密度脂蛋白含量均显著升高(P<0.05),高密度脂蛋白含量没有统计学上的显著差异,说明高胆固醇血症模型建立成功。
(2)正常大鼠PNU282987后处理组血清cTnI、CK-MB浓度和梗死面积较正常大鼠IR组显著降低(P<0.05)。高胆固醇血症大鼠IR组血清cTnI、CK-MB浓度和梗死面积显著大于同周龄的正常大鼠IR组(P<0.05)。高胆固醇血症大鼠PNU282987后处理组血清cTnI、CK-MB浓度和梗死面积较高胆固醇血症大鼠IR组显著降低(P<0.05)。
(3)正常大鼠PNU282987后处理组血清TNF-α、HMGB1、IL-6浓度和梗死面积较正常大鼠IR组显著降低(P<0.05)。高胆固醇血症大鼠IR组血清TNF-α、HMGB1、IL-6浓度显著大于同周龄的正常大鼠IR组(P<0.05)。高胆固醇血症大鼠PNU282987后处理组的血清TNF-α、HMGB1、IL-6浓度较高胆固醇血症大鼠IR组均显著降低(P<0.05)。
结论:
PNU282987后处理可以对正常大鼠缺血心肌产生显著的保护作用。高胆固醇血症可能会增加缺血再灌注后心肌损伤的程度。PNU282987后处理对高胆固醇血症大鼠缺血心肌产生明显的保护作用,其机制可能与抑制炎症反应有关,具体机制有待进一步研究阐明。
目前,绝大多数药物后处理对心肌缺血再灌注损伤的实验研究都是在正常动物模型上进行的。然而实际上临床心肌缺血的患者通常伴随有其他病理状况,例如高胆固醇血症。因此本实验针对高胆固醇血症的动物进行药物后处理研究,评价α7烟碱能乙酰胆碱受体激动剂PNU282987后处理对大鼠高胆固醇血症基础上发生的心肌缺血再灌注损伤的影响及其可能的机制。
方法:
(1)建立高胆固醇血症大鼠模型:将健康、雄性Sprague-Dawley大鼠(190-220g)喂食高胆固醇饮食8周以构建高胆固醇血症模型。另外取同源大鼠喂食正常饮食作为对照。采用自动生化分析仪分别测定各组大鼠饲养前和8周末的血清总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白和低密度脂蛋白含量来鉴定高胆固醇血症大鼠模型是否建立成功。
(2)采用结扎冠状动脉左前降支30min,再灌注180min来建立在体心肌缺血-再灌注损伤模型。采用再灌注前腹腔注射PNU2829872.4mg/kg来制备药物后处理模型。再灌注结束后取血样,应用酶联免疫吸附实验的方法分别测定血清心肌肌钙蛋白I、血清肌酸激酶心肌型同工酶的浓度。然后通过伊文思蓝和氯化三苯基四氮唑双重染色检测心肌梗死面积。
(3)按照第二部分进行试验,通过酶联免疫吸附实验的方法分别检测各组血清炎症因子:肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、高迁移率组蛋白1(HMGB1)、血清白介素-6(IL-6)的浓度。
结果:
(1)与正常饮食喂养组相比,高胆固醇饮食喂养组大鼠血清总胆固醇含量、甘油三酯和低密度脂蛋白含量均显著升高(P<0.05),高密度脂蛋白含量没有统计学上的显著差异,说明高胆固醇血症模型建立成功。
(2)正常大鼠PNU282987后处理组血清cTnI、CK-MB浓度和梗死面积较正常大鼠IR组显著降低(P<0.05)。高胆固醇血症大鼠IR组血清cTnI、CK-MB浓度和梗死面积显著大于同周龄的正常大鼠IR组(P<0.05)。高胆固醇血症大鼠PNU282987后处理组血清cTnI、CK-MB浓度和梗死面积较高胆固醇血症大鼠IR组显著降低(P<0.05)。
(3)正常大鼠PNU282987后处理组血清TNF-α、HMGB1、IL-6浓度和梗死面积较正常大鼠IR组显著降低(P<0.05)。高胆固醇血症大鼠IR组血清TNF-α、HMGB1、IL-6浓度显著大于同周龄的正常大鼠IR组(P<0.05)。高胆固醇血症大鼠PNU282987后处理组的血清TNF-α、HMGB1、IL-6浓度较高胆固醇血症大鼠IR组均显著降低(P<0.05)。
结论:
PNU282987后处理可以对正常大鼠缺血心肌产生显著的保护作用。高胆固醇血症可能会增加缺血再灌注后心肌损伤的程度。PNU282987后处理对高胆固醇血症大鼠缺血心肌产生明显的保护作用,其机制可能与抑制炎症反应有关,具体机制有待进一步研究阐明。