多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)Cp-S316抗菌物质的提取、体外抑菌试验及毒性研究

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多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)Cp-S316是本实验室从泰山土壤分离获得的一株拮抗细菌。前期研究结果表明,该菌株抗菌谱广,菌株发酵性状优异,发酵液性质稳定,显示了诱人的开发前景。本文进行了Cp-S316抗菌物质的提取,体外抑菌试验及其毒性等研究,主要内容如下: 1.通过吸附与解吸附试验,研究了7种阳离子交换树脂和4种阴离子交换树脂对Cp—S316抗菌物质的交换性能,筛选出一种对该抗菌物质吸附和解吸效果较好的树脂。研究了该树脂对Cp—316抗菌物质吸附量、最佳解吸剂、静态解吸曲线和动态解吸曲线。主要结果如下:大孔弱酸性阳离子交换树脂D151对抗菌物质具有较好的吸附性能和解吸性能。静态条件下1g树脂处理100mL发酵液吸附率可达87.33%;0.6mol/L的HCl和0.5mol/L H2SO4都可以较好的将抗菌物质解吸,并最终确定0.6mol/L的HCl为最佳解吸剂,该解吸剂对抗菌物质的静态解吸率为58.04%(树脂:解吸剂=1:6(g/mL));动态条件下解吸率为92.24%,其中抗菌物质较为集中的解吸液(树脂:解吸液=1:4.3(g/mL))的解吸率为83.75%。另外,通过试验建立了该抗菌物质的活性检测方法,进行了发酵液预处理条件的研究,结果表明草酸最适含量为0.4% 2.采用试管二倍稀释法,研究了Cp—S316抗菌物质对大肠杆菌、产气杆菌、鼠伤寒沙门氏菌、鸡白痢沙门氏菌、鸡巴氏杆菌和金黄葡萄球菌6种动物病原细菌的MIC和MBC,测定了大肠杆菌、产气杆菌、鼠伤寒沙门氏菌和金黄葡萄球菌的杀菌曲线,研究了培养条件对药物抗菌活性的影响。主要结果如下:Cp—S316抗菌物质对大肠杆菌、产气肠杆菌、鼠伤寒沙门氏菌、鸡白痢沙门氏菌、鸡巴氏杆菌的MIC分别为12.5μg/mL、12.5μg/mL、6.25μg/mL、12.5μg/mL和12.5μg/mL,MBC分别为25μg/mL、25μg/mL、12.5μg/mL、50μg/mL和25μg/mL,对金黄葡萄球菌的MIC为
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