家族性渗出性玻璃体视网膜病变(Familial Exudative Vitreoretinopathy,FEVR)是一种遗传性眼科疾病,主要特征为视网膜周边血管发育异常和病变。表现为视网膜血管的出血、渗漏、牵拉等,甚至造成视网膜脱落并导致失明。FEVR的发病原因复杂;根据相关研究表明,遗传因素在该病的发病过程中起着十分关键的作用。至少5个基因的突变目前已经被发现可导致FEVR:TSPAN12,FZD4,NDP,ZNF408和LRP5。但是,这些突变只能解释约一半的FEVR病例。所以,寻找新的致病基因或致病突变,对该疾病的致病机制进行深入地研究,为该疾病的临床诊断和干预治疗提供帮助。FEVR是一种进行性的严重的视网膜遗传疾病,到目前为止该疾病还没有有效的治疗方法,具体分子机制尚不清楚。该研究扩充了我国汉族人群FEVR疾病的遗传数据库,可为该疾病的分子诊断和遗传咨询提供依据。本文通过研究4个中国FEVR家系病例,探索其致病突变与疾病表型之间的关系。收集家系中患者及亲属的外周血制备基因组DNA,设计引物以扩增FEVR致病基因FZD4,LRP5,NDP和TSPAN12的外显子区域并通过Sanger法进行测序分析,找出突变位点。用生物信息学手段进行,进行突变的保守性分析,构建突变质粒,通过Western blotting实验,分析各突变蛋白质表达的变化;另外通过荧光素酶报告基因活性实验,来验证突变对蛋白表达的影响程度。通过眼底照、OCT等临床数据确诊患者为FEVR患者,Sanger测序找到确定的LRP5突变位点;Western blotting实验结果表明突变蛋白表达不稳定、通过荧光素酶活性检测来确定在复杂的生理条件下这些蛋白的突变能否激活Norrin/β-catenin信通号路,结果显示这些位点的突变都引起了荧光素酶活性的显著下降。在LRP5基因上存在3个未在dbSNP数据库及千人基因组计划数据库中报道过的杂合突变c.542T>G:p.M181R,c.1197G>T:p.R399S和c.1507G>A:p.G503R,以及2个已发现但未在FEVR中报道过的杂合突变p.R494Q和c.2626G>A:p.G876S。生物信息学分析表明这5个突变均为有害突变,且突变位点高度保守。进一步的荧光素酶报告基因实验证明了这5个突变均不能激活Norrin/β-catenin信号通路,从而证明了这5个突变的致病性。