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谷氨酸受体（glutamate receptors, GluRs）是脑内广泛存在的受体，可分为离子型和代谢型两大类。离子型谷氨酸受体包括NMDA受体、AMPA受体、海人藻酸受体三种亚型。关于代谢型谷氨酸受体（metabotropic glutamate receptor, mGluRs），已克隆出8种亚型，分别为mGluR1, mGluR2, mGluR3, mGluR4, mGluR5, mGluR6, mGluR7, mGluR8。根据氨基酸的序列相似性，信号转导机制及激动剂的选择性不同，可将这些mGluRs分为G-Ⅰ（mGluR1/5）、G-Ⅱ（mGluR2/3）和G-Ⅲ（mGluR4/6/7/8）三组。这些受体被其配体谷氨酸和门冬氨酸激活后，通过不同的细胞内信号传导系统，参与体内众多的生理和病理过程。近年来，这些受体，特别是离子型谷氨酸受体在脑缺血耐受（brain ischemic tolerance, BIT）诱导中的作用引起各国学者的关注，已发现NMDA受体在一定程度上参与BIT的诱导。但是，关于mGluRs是否参与BIT诱导尚未见确切报道。国外学者曾在沙土鼠全脑缺血模型中，运用免疫组化方法研究发现，G-Ⅰ组mGluRs在单纯全脑缺血模型和BIT模型中的表达有微弱差别，提示mGluR1/5可能参与BIT的诱导，但尚无其它更确切的实验依据。而关于G-Ⅱ组mGluRs是否参与BIT的诱导，国内外文献尚未见报道。鉴于mGluRs在脑内广泛存在，且类型众多，对神经元可塑性、兴奋性以及细胞膜离子通道（如钙通道等）功能的广泛影响，有理由推测其在BIT的诱导中可能发挥作用。因此，本研究的目的在于确定mGluRs在BIT诱导中的作用，为最终阐明BIT的形成机制提供依据。1 mGluRs参与BIT诱导并影响GFAP表达采用大鼠四血管闭塞全脑缺血模型，应用硫堇染色法和免疫组化SP法，观察mGluR1/5阻断剂(s)-4-carboxy-3-hydroxy-phenylglycine（(s)-4C3HPG）和mGluR2/3阻断剂α-methyl-(4-tetrazolyl-phenyl) glycine (MTPG)对BIT诱导和胶原纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic<WP=5>protein, GFAP）表达的影响，以确定mGluRs在BIT诱导中的作用。1.1 mGluR1/5阻断剂(s)-4C3HPG参与BIT诱导并影响GFAP表达将36只永久凝闭椎动脉的 Sprague Dawley (SD)大鼠（体重280g～320g）随机分为以下四组：①sham组（n=6）：游离双侧颈总动脉，但不夹闭；②损伤性缺血组（n=6）：夹闭双侧颈总动脉8 min；③脑缺血预处理（cerebral ischemic preconditioning，CIP）+损伤性缺血组（n=6）：夹闭双侧颈总动脉3 min，恢复再灌流24 h后再行夹闭8 min；④(s)-4C3HPG组（n=18）：右侧脑室注射(s)-4C3HPG后20 min 行CIP，恢复再灌流24 h后再行夹闭双侧颈总动脉8 min；依据应用(s)-4C3HPG的剂量不同，进一步将该组动物分为0.2 mg 组（n=6）、0.04 mg 组（n=6）和0.008 mg组（n=6）。夹闭颈总动脉过程中，观察到大鼠瞳孔散大，脑电波频率变慢，波幅逐渐缩小甚至呈等电位线，证明产生脑缺血。各组大鼠均在术后或末次缺血再灌后7天灌注取材观察。硫堇染色显示，sham组海马CA1区锥体细胞可见2～3层，组织学分级（0级：无神经元死亡；1级：散在的神经元死亡；2级：成片的神经元死亡；3级：几乎全部神经元死亡。以下同。）为0～1级，神经元密度（1 mm长度内锥体神经元的个数。以下同）为181±10.5。损伤性缺血组，海马CA1区锥体细胞稀疏，层次不清楚，有大片缺失，组织学分级为2～3级，神经元密度为42±6.7，与sham组相比有显著差异（P<0.05）。CIP+损伤性缺血组海马组织学特征与sham组相似，表明3 min CIP可对其后间隔1天的8 min缺血造成的海马CA1区神经元损伤产生明显的保护作用。(s)-4C3HPG组中，0.2 mg组的形态学改变最为明显，表现为海马CA1区锥体细胞稀疏，排列松散，有大量锥体细胞缺失，组织学分级明显升高（P<0.05）,神经元密度明显下降（P<0.05）。0.04 mg组、0.008 mg组的形态学改变依次减轻。各剂量组组织学分级和神经元密度的变化与(s)-4C3HPG的剂量呈现明显的相关性，与sham组相比均有显著差异（P<0.05）。GFAP免疫组化染色显示星形胶质细胞呈星形或蜘蛛状，有明显的突起。sham组海马CA1区仅见少量GFAP阳性细胞，突起较少、短，染色较淡。损伤性缺血组海马CA1区GFAP阳性细胞数目明显<WP=6>增多，胞体肥大，突起增粗、变长现象明显，与sham组相比，其阳性细胞数目、总面积、平均光密度显著增加（P<0.05）。CIP+损伤性缺血组海马CA1区阳性细胞数与sham组相比有增多趋势，但无统计学差异（P >0.05）。(s)-4C3HPG组海马CA1区GFAP阳性细胞数目明显增多，染色加深，表现为胞体肥大，突起增多，变粗，延长，尤以大剂量(s)-4C3HPG时明显，GFAP阳性细胞数目、总面积、平均光密度与sham组、CIP+损伤性缺血组相比均明显增加（P<0.05）。1.2 mGluR2/3阻断剂MTPG参与BIT诱导并影响GFAP表达将70只永久凝闭椎动脉的SD大鼠（体重280g～320g）随机分为以下七组：①sham组（n=8）：游离双侧颈总动脉，但不夹闭；②CIP组（n=8）：游离并夹闭双侧颈总动脉3 min；③损伤性缺血组（n=8）：夹闭双侧颈总动脉8 min；④CIP+损伤性缺血组（n=8）：夹闭双侧颈总动脉3 min，恢复再灌流24 h后再行夹闭8 min；⑤MTPG+CIP+损伤性缺血组（n=22）：首先右侧脑室注射MTPG，20 min?