【摘 要】
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目的:本课题通过临床研究结合体外实验的方法,探讨CHD1L在非小细胞肺癌（Nonsmall-cell lung cancer,NSCLC）患者中的表达情况,分析CHD1L的表达与NSCLC患者临床病理参数及预后的关系;利用RNAi技术敲减CHD1L后,分析肺腺癌细胞系侵袭、转移能力的变化情况,探讨CHD1L如何通过下游基因SPOCK1促进肿瘤侵袭、转移的分子机制,为NSCLC患者早期诊断、临床治疗
【基金项目】
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山西省研究生创新项目:CHD1L通过上调SPOCK1介导非小细胞肺癌侵袭转移的机制研究（2C592019080）； 山西省基金面上项目:ADARs与非小细胞肺癌发病及预后研究（201801D121347）； 山西省留学基金项目:CHD1L通过上调ARHGEF9介导EMT在NSCLC侵袭、转移中的机制研究（2020-156）
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目的:本课题通过临床研究结合体外实验的方法,探讨CHD1L在非小细胞肺癌（Nonsmall-cell lung cancer,NSCLC）患者中的表达情况,分析CHD1L的表达与NSCLC患者临床病理参数及预后的关系;利用RNAi技术敲减CHD1L后,分析肺腺癌细胞系侵袭、转移能力的变化情况,探讨CHD1L如何通过下游基因SPOCK1促进肿瘤侵袭、转移的分子机制,为NSCLC患者早期诊断、临床治疗及预后提供新的理论依据。方法:1.筛选提取2017年1月至2017年12月在山西省肿瘤医院病理科被诊断为NSCLC的患者病理组织蜡块,共计284例。其中有腺癌134例,鳞癌150例。并选择其中54例鳞癌的癌旁正常组织以及39例腺癌的癌旁正常组织作为对照,分别制作组织芯片。2.采用免疫组织化学法（IHC）对制作好的组织芯片进行CHD1L蛋白表达的检测,分析CHD1L蛋白表达与其临床病理参数以及预后的关系。3.体外应用RNAi技术,在肺腺癌细胞系中敲低CHD1L基因的表达。应用Trans-well实验和细胞划痕实验检测肺腺癌细胞系侵袭及迁移能力的变化;应用Western-blot和免疫荧光实验检测CHD1L以及其下游基因SPOCK1和转移相关基因Vimentin和MMP2的表达情况。探索CHD1L在NSCLC中的分子调控机制。结果:1.IHC结果:CHD1L蛋白主要定位于肿瘤组织的细胞核。CHD1L在肺腺癌组织中的阳性表达率51%（68/134）,显著高于腺癌癌旁正常组织的阳性表达率5%（2/39）,差异具有统计学意义（P<0.05）。CHD1L在肺鳞癌中的阳性表达率27%（41/150）,显著高于肺鳞癌癌旁正常组织的阳性表达率2%（1/54）,差异具有统计学意义（P<0.05）。CHD1L在肺腺癌中的阳性表达率显著高于肺鳞癌中的阳性表达率,差异具有统计学意义（P<0.05）。并且在肺腺癌中,CHD1L的表达与淋巴结转移和临床分期相关（P<0.05）。2.CHD1L在<60岁的NSCLC患者中的阳性表达率46%（56/123）,显著高于≥60岁患者的阳性表达率33%（53/161）,差异具有统计学意义（P<0.05）。在<60岁的肺腺癌以及≥60岁的肺鳞癌患者中,CHD1L阳性表达患者的总生存期（Overall survival,OS）要比阴性表达患者的OS短。3.在通过RNAi技术敲减CHD1L后,肺腺癌细胞的侵袭及转移能力下降。同时其下游基因SPOCK1和EMT相关基因Vimentin和MMP2的蛋白含量也随之下降。结论:1.CHD1L参与了NSCLC的发生与发展。在肺腺癌患者中,CHD1L能够促进肿瘤的侵袭以及转移。2.在<60岁的肺腺癌患者中,CHD1L的表达可能作为NSCLC患者的预后指标之一。3.CHD1L在肺腺癌中可能通过上调下游基因SPOCK1,介导EMT促进肿瘤的侵袭转移。我们的研究结果提示CHD1L可能在肺腺癌的临床治疗上作为一个靶基因。
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