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侧柏叶,为柏科植物侧柏（Platycladus orientalis（L.）Franco）的干燥枝梢及叶,始载于《神农本草经》并列为木部上品,其味苦,入肺、肝、脾经,主吐血衄血痢血,崩中赤白,轻身益气,令人耐寒暑,去湿痹,止饥。为燥湿仙丹,系补阴要药,中医临床常用于凉血止血,镇咳祛痰。其生品已具有良好的止血作用,而各医家遵循“红见黑则止”的理论,更多地选取其炭制品入药止血。本课题以中药饮片侧柏炭为对象,研究内容主要包括五大部分:文献研究、止血机理研究、饮片炮制工艺规范化研究、质量标准研究和指纹图谱研究。各部分研究内容概述如下:1.文献研究查阅相关古今文献,系统整理国内外多家学者的研究成果及专著论述,对本课题的研究对象侧柏叶的炮制历史沿革、化学成分、质量标准、药理作用及临床应用等各方面资料进行综述。2.止血机理研究采用小鼠经典药理血证模型,以小鼠出血时间和凝血时间为指标,对侧柏炭的各化学部位进行药效学筛选,结果表明侧柏炭总黄酮部位是其止血作用主要活性部位。同时对侧柏叶炒炭前后的总黄酮含量、鞣质含量及化学成分相对含量的变化进行初步探讨,结果表明侧柏叶经炒炭后总黄酮含量相对生品下降了26.57%,而槲皮素相对含量升高了37.27%;鞣质含量相对下降了48.15%,而无明显化学成分的相对提高;吸附力炭品较生品略提高了2.67%。因此我们初步推断侧柏叶炒炭前后黄酮类成分的变化与其止血作用的增强有紧密关系,并确定以槲皮素为指标,进行后续炮制工艺及质量标准研究。3.饮片炮制工艺规范化研究本课题以槲皮素为指标,利用智能化滚筒式炒药机对侧柏炭实验室炮制工艺进行验证,同时结合正交设计,以炒制温度与炒制时间为因素,优选出最佳炮制工艺参数。结果表明,实验室设备与生产设备有较大差距,应以生产设备为准,并优选出侧柏炭炮制的最佳工艺为炒制温度控制在250℃,炒制时间6min。该工艺稳定可行,以此条件制备出10批次侧柏炭中试饮片,得率均在85%以上,满足工厂生产要求。4.质量标准研究采用药典规定项下各方法对侧柏炭饮片进行定性鉴别研究,包括显微、理化、薄层鉴别;各项检查,包括水分、灰分、浸出物、重金属及砷盐检查;以及总黄酮和槲皮素的含量测定等,初步制订了侧柏炭饮片的质量标准草案:水分不得过6.0%;总灰分不得过14.5%;酸不溶性灰分不得过4.0%;水溶性浸出物不得少于14.5%;50%乙醇溶性浸出物不得少于13.5%;侧柏炭中总黄酮以槲皮素计,含量不得低于0.035%;侧柏炭中槲皮素(C15H11O7)含量不得低于0.01%。5.指纹图谱研究利用超高效液相色谱技术建立侧柏炭饮片标准指纹图谱,实验采用小粒径填料填充的Acquity UPLC BEH C18色谱柱（2.1mm×50mm,1.7μm）;以甲醇-1%甲酸溶液为流动相梯度洗脱;流速:0.2ml/min;柱温:30℃;检测波长:375nm;进样量:2μl。对10批侧柏炭中试饮片进行测定,标定共有峰,以槲皮素为内参比,采用《中药色谱指纹图谱相识度评价系统2004A版》软件计算出其相似度范围在0.729～0.997,并得出了侧柏炭的对照指纹图谱。同时应用UPLC-MS联用技术,对侧柏炭进行初步的化学成分分析,并鉴别出4个黄酮类化合物:杨梅素、槲皮苷、槲皮素和山柰酚。相对于常规HPLC而言,UPLC有更好的分离效率、峰容量以及灵敏度,操作简单,大大缩短了分析时间,精密度、稳定性和重现性良好,可用作侧柏炭饮片的质量控制。