【摘 要】
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本研究采用特异性等位基因PCR方法,检测CTLA-4外显子4的3′非翻译区包含(AT)n重复序列的等位基因。扩增产物用12%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,硝酸银染色。研究对象为黑龙江省
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本研究采用特异性等位基因PCR方法,检测CTLA-4外显子4的3′非翻译区包含(AT)n重复序列的等位基因。扩增产物用12%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,硝酸银染色。研究对象为黑龙江省范围内无血缘关系的汉族IBD患者137例。IBD病例诊断标准按改良的Mendeloff标准。部分PCR产物经Biotage基因公司测序,测序样品作为阳性对照,辅助计数条带bp值。直接判读个体基因型,以Hardy-Weinberg平衡检验确认研究样本的群体代表性,计算疾病患者组和正常对照组基因型频率、等位基因频率。组间比较采用X2检验和精确概率法检验。计算优势比(odds ratio,OR)及其95%可信区间(confidence interval,CI),P<0.05认为有显著性统计学意义。统计在SPSS 12.0软件包中进行。结果为:1、黑龙江省汉族人群IBD患者CTLA-4外显子4的3′非翻译区包含(AT)n重复序列有20种等位基因。2、与正常对照组比较,并经过Bonferroni多重教正后,UC患者中仅122bp等位基因频率显著增高,差异有统计学意义(P=0.0001/Pc=0.0025,OR=11.283,95%CI:2.369~49.327)。3、CD患者中118bp、122bp等位基因频率高于正常对照组,但是经过Bonferroni校正后仅122bp等位基因频率显著增高,差异有统计学意义(P=0.0003/Pc=0.0050,OR=22.115,95%CI:3.586~108.621)。得到了实验前预想的结果,结论为细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4基因(CTLA-4)微卫星多态性与黑龙江省IBD具有相关性。
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