盐酸瑞芬太尼对体外培养人肝癌SMMC-7721细胞生物活性的影响

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目的:观察不同浓度的盐酸瑞芬太尼对体外培养肝癌细胞株SMMC-7721增殖、凋亡以及迁移能力的影响。方法:体外培养人肝癌SMMC-7721细胞至对数期,接种到96孔板或6孔板中,随机分成8组。实验分为8组,实验组(R1-R7)在RPMI-1640培养液中加入瑞芬太尼,使对应的终浓度分别为0.001、0.01、0.1、1、10、100、200μmol/L,每组设6个平行副孔,空白对照组(N)加入等剂量的RPMI-1640培养液。孵育48h时后用透射电子显微镜观察细胞的超微结构;孵育24h、48h、72h时后用CCK-8法测定细胞的增殖活性;孵育24h时后用流式细胞仪测定细胞的凋亡情况和细胞的周期分布;孵育48h时用划痕实验检测细胞的迁移能力。结果:1.孵育48h后,瑞芬太尼组人肝癌细胞出现了不同程度的细胞肿胀、细胞染色体碎裂、边集。空白对照组的细胞外形正常,细胞膜、细胞核和细胞器等亚显微结构较完整。2.用CCK-8测定细胞增殖活性,瑞芬太尼浓度≥0.1μmol/L时,R3-R7瑞芬太尼组72h增殖率为(0.917±0.032)%、(0.898±0.040)%、(0.861±0.057)%、(0.849±0.022)%、(0.853±0.036)%均明显低于空白对照组的(1.121±0.051)%(P<0.05),但100μmol/L (R6)和200umol/L(R7)两个组之间的差异无统计学意义(P>0.05);3.当瑞芬太尼≥0.1μmol/L时,瑞芬太尼组(R3-R7)的凋亡率为(20.8±0.98)%、(27.6±1.21)%、(34.2±0.83)%、(38.8±0.97)%、(39.1±0.87)%,高于空白对照组(12.3±1.47)%(P<0.05)。瑞芬太尼组(R1-R7)G0/G1期比例均高于空白对照组(P <0.05),S期比例明显减少(P<0.05),R6和R7两个组之间差异无统计学意义(P>0.05)。4.瑞芬太尼组(R1-R7)的愈合率(40.03±1.84)%、(34.51±1.79)%、(31.67±1.97)%、(25.87±1.49)%、(19.36±2.08)%、(12.40±2.14)%、(13.86±2.34)%,均小于空白对照组(44.37±2.57)%(P<0.05),但R6和R7两组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:当瑞芬太尼浓度≥0.1μmol/L时,能抑制人肝癌SMMC-7721细胞的增殖,并降低肝癌细胞的迁移能力,可能与促进细胞凋亡,影响细胞周期有关。
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