目的运用W/O型机械乳化离子交联法制备秋水仙碱海藻酸钠微球,通过微球缓释、黏膜粘附及滞留梗阻区的特性,考察秋水仙碱及秋水仙碱微球两种制剂类型治疗甲基苄基亚硝胺诱发大鼠食管癌病变模型的可行性。方法第一部分微球制备及其表征研究采用W/O型机械乳化离子交联法制备海藻酸钠微球,在高速分散均质机搅拌下将氯化钙溶液滴入不同浓度的海藻酸钠溶液中,混合均匀后,加入一定体积的大豆油中进行机械乳化至乳化充分。海藻酸钠交联成球后,在W/O型乳液中加入石油醚破乳,离心留取沉淀,鼓风干燥制得海藻酸钠微球。将20mg·ml^-1海藻酸钠浓度、4000r·min^-1均质机转速及5min机械乳化时间这三个因素中的任意两个因素作为固定因素,对另一因素进行分析,分别测定海藻酸钠浓度、均质机转速及乳化时间对微球粒径体积占比的影响。通过张力实验研究不同微球混悬液浓度的黏膜粘附力。配制秋水仙碱海藻酸钠溶液,采用W/O型机械乳化离子交联法制备秋水仙碱微球。运用透析法研究载药微球体外药物缓释特性。光学显微镜及扫描电子显微镜用以观察微球形态。第二部分秋水仙碱对MBNA诱发大鼠食管癌的治疗作用wistar大鼠（体重180?20g,清洁级,雄性）,适应性喂养2周后,随机分为正常组和诱变组。正常组采用生理盐水颈背部注射,诱变组采用甲基苄基亚硝胺(3.5mg·kg^-1)颈背部注射诱变10周,每周两次。诱变6周后食管上皮细胞异常增生改变后,给药与诱变同时进行,并根据体重随机分为模型组、秋水仙碱低剂量组、秋水仙碱高剂量组、秋水仙碱微球低剂量组、秋水仙碱微球高剂量组,连续给药13周。研究秋水仙碱及秋水仙碱微球两种制剂类型对大鼠食管癌模型的干预作用,根据食管/股骨系数比、瘤体体积、TUNEL凋亡率以及caspase-3的表达观测秋水仙碱对大鼠食管瘤体的抑制情况以及两种制剂类型给药的疗效差异。通过血液白细胞计数、胃肠排空障碍、血清生化指标研究此给药剂量下秋水仙碱是否产生一定的副作用。结果第一部分微球制备及其表征研究1.海藻酸钠浓度增大、均质机转速减少,大粒径微球体积占比增加;乳化时间在5、15min,微球以中、小粒径微球体积占比为主。2.将海藻酸钠溶于秋水仙碱溶液中,通过W/O型机械乳化离子交联法可制备秋水仙碱微球。固定均质机转速、乳化时间,改变海藻酸钠浓度可制备大、中、小粒径微球体积为主体的微球。大、中、小粒径微球体积为主体的微球结果表明:三者体外释药无明显差别;大粒径体积为主体的微球包封率大于小粒体和中粒径为主体的微球;微球黏膜粘附实验中,微球载药前后黏膜粘附力无明显差别,中粒径体积为主体的微球黏膜粘附力大于小粒体和大粒径体积为主体的微球的粘附力。3.以海藻酸钠溶液浓度20mg·ml^-1、均质机转速2000r·min^-1、乳化时间5min制备的秋水仙碱微球中,6h内表现持续药物缓释特性;体外黏膜粘附结果表明微球混悬液浓度在20mg·ml^-1时具有良好黏膜粘附性能;电镜显示微球呈规则球形,表面粗糙,分散良好。第二部分秋水仙碱对MBNA诱发大鼠食管癌的治疗作用1.食管黏膜病理形态学结果显示正常组大鼠食管黏膜光滑平整,模型组与给药组食管出现全段病变,黏膜粗糙、出现乳突瘤样改变,模型组大体积瘤体数较多。2.模型组食管质量增加明显,秋水仙碱高剂量组食管质量减轻明显（P<0.05）。3.食管/股骨系数比结果显示,同正常组与给药组相比,模型组食管/股骨系数比明显增高（P<0.01）;与模型组相比,秋水仙碱微球高剂量组食管/股骨系数比下降明显（P<0.01）。4.瘤体体积结果显示,秋水仙碱可减小瘤体体积,秋水仙碱高剂量组、秋水仙碱微球高、低剂量组瘤体体积减小明显（P<0.05）。5.Tunel检测凋亡结果表明,给药组阳性细胞表达增多（P<0.05）,秋水仙碱微球低剂量较同等剂量秋水仙碱组阳性细胞表达增多（P<0.05）。6.Caspase-3免疫组化结果显示,给药组阳性细胞表达增多（P<0.05）。7.食管黏膜组织细胞周期中,秋水仙碱高剂量组与秋水仙碱微球高、低剂量组中S+G2/M期细胞数减少,G0/G1期细胞数增多（P<0.05）。8.胃肠排空障碍实验、肝/股骨脏器系数比及血清指标表明秋水仙碱对大鼠胃肠及肝功有一定损伤。结论1.秋水仙碱海藻酸钠溶液与氯化钙通过W/O型机械乳化离子交联法可制备成秋水仙碱海藻酸钠微球。2.海藻酸钠浓度、均质机转速、乳化时间均可影响微球粒径体积占比。3.秋水仙碱海藻酸钠微球载药、体外黏膜粘附、释药良好。4.秋水仙碱可促进肿瘤细胞凋亡,上调caspase-3的表达量,减小大鼠食管瘤体体积,减小食管系数比,缓解大鼠食管梗阻。5.食管/股骨系数比能反映食管病变增生程度,可作为病变程度的量化指标。6.秋水仙碱微球组较同等剂量秋水仙碱组具有更好疗效。