目的:包皮龟头炎是男性常见的生殖器皮肤疾病,由多种原因导致阴茎包皮和龟头皮肤发生炎症性改变。皮肤菌群是指皮肤表面栖息着许多微生物,包括细菌,真菌和病毒。皮肤菌群失调可参与许多皮肤病的发生,比如特应性皮炎、银屑病、脂溢性皮炎、痤疮和毛囊炎等。皮肤物理屏障功能是指皮肤能够抵抗微生物、摩擦、紫外线、化学物质等影响,皮肤物理屏障功能的破坏会引起皮肤过敏、感染等一些其他疾病的发生。然而,目前没有与包皮龟头炎相关的皮肤菌群测序和皮肤屏障功能检测的研究。本课题组前期通过对包皮龟头炎患者的龟头皮损处进行小样本的细菌菌群测序和皮肤物理屏障功能检测发现,患者的皮肤屏障功能受损,在细菌菌群上提出芬戈尔德菌属（Finegoldia）和普氏菌属（Prevotella）为可疑的致病菌。据此,本研究旨在通过增加包皮龟头炎皮肤细菌菌群和真菌菌群的测序位点（龟头、冠状沟、内侧包皮和外侧包皮）,以及对龟头、内侧包皮、外侧包皮和腹股沟外侧进行皮肤物理屏障功能检测（透皮水丢失、表皮含水量和p H）,获得全面且系统的皮肤菌群、皮肤物理屏障功能与包皮龟头炎的关系,并评价乳酸菌、氯碘羟喹对包皮龟头炎的治疗效果。研究方法:1、本研究首先对29个健康受试者和26个非真菌性包皮龟头炎患者的龟头部位,进行皮肤物理屏障功能检测（透皮水丢失、表皮含水量和p H）;同时收集该部位的皮肤细菌菌群,提取样本核酸、16s r RNA基因扩增、测序、聚类、比对、注释,获得皮损部位的细菌菌群分布及生物多样性描述;患者随机分为三组,组1使用夫西地酸（早一次1g）+保湿剂（晚一次1g）,组2使用保湿剂（早一次1g）+乳杆菌（晚一次1粒）,组3使用夫西地酸（早一次1g）+乳杆菌（晚一次1粒）;患者使用药物十天后随访,评价各组的治疗效果,进行比较皮肤菌群及皮肤物理屏障功能数据。2、招募到66位健康受试者（限制年龄在18-28岁）,收集社会人口学数据,然后对龟头、冠状沟、内侧包皮和外侧包皮这四个位点进行皮肤细菌菌群（16s r RNA）和真菌菌群（ITS）的测序;同时对龟头、内侧包皮、外侧包皮和腹股沟外侧进行皮肤物理屏障功能检测（透皮水丢失TEWL、表皮含水量SH和皮肤表面酸碱度p H）。3、招募到包皮龟头炎患者32位,收集社会人口学数据,进行一项随机、双盲、安慰剂对照评价氯碘羟喹治疗包皮龟头炎有效性和安全性的临床研究试验,根据随机数表,将患者分为2组,一组使用氯碘羟喹实验组,一组使用氯碘羟喹基质安慰剂组:治疗2周,然后停药2周,共计4周;在入组时（W0）、治疗第一周（W1）、治疗第二周（W2）以及停药二周（W4）时随访;对龟头、冠状沟、内侧包皮和外侧包皮这四个位点进行皮肤细菌菌群（16s r RNA）和真菌菌群（ITS）的测序;同时对龟头、内侧包皮、外侧包皮和腹股沟外侧进行皮肤物理屏障功能检测（透皮水丢失TEWL、表皮含水量SH和皮肤表面酸碱度p H）;与第二部分的健康受试者进行水平比较,以及治疗过程中的实验组和安慰剂组的组间比较和各组的前后比较。结果:1、区分健康受试者（HC,n=29）中包皮超过冠状沟的组（HCRP,n=20）和包皮未超过冠状沟的组（HCNP,n=9）,HCRP比HCNP表现为高TEWL、高SH。包皮龟头炎患者（BP,n=26）中25/26表现为包皮超过冠状沟,BP和HCRP比较,发现BP有低SH和高p H。使用药物如夫西地酸（第一组）、乳酸菌（第二组）、两者联合（第三组）治疗后,第一组严重程度评分改善率为89.5%,第二组为70.2%,第三组为80.8%。但是患者的皮肤屏障功能没有发生明显改变。通过水平比较健康受试者和患者,发现患者有明显较多的二路普氏菌（Prevotella bivia）和沃氏葡萄球菌（Staphylococcus warneri）,且这两菌与疾病严重程度正相关;治疗后发现二路普氏菌（Prevotella bivia）在乳酸杆菌的干预下明显减少,但是葡萄球菌属明显增多。2、对于66个健康受试者的龟头、内侧包皮、外侧包皮和腹股沟外侧四个位点的皮肤屏障功能检测,发现龟头和内侧包皮的SH和TEWL受包皮覆盖程度的影响,覆盖越多,SH和TEWL越高,维持了一个高水平的含水量和透皮水丢失。阴茎皮肤表面p H值均为5.5左右,不受检测位点和包皮长度的影响。健康受试者皮肤真菌和细菌的菌群生态学分析,在Alpha多样性和Beta多样性上,龟头、冠状沟、内侧包皮三个位点间均无差异,外侧包皮与这三个位点有显著性差异。在细菌中多见葡萄球菌、棒状杆菌、普氏菌、大芬菌和卟啉单胞菌;在真菌中多见马拉色菌。3、招募到32个包皮龟头炎患者,与上述的66个健康受试者相比,患者频率较多的是吸烟、饮酒,性生活人数占比高;和健康受试者相比患者的龟头、内侧包皮、外侧包皮和腹股沟外侧四个位点的皮肤屏障功能仅表现出龟头和内侧包皮的低SH。由于本双盲实验的盲底还未揭晓,其中组A的W1严重程度改善率平均值为51.7%,W2改善率平均值为84.8%,W4改善率平均值为78.3%;组B的W1改善率平均值为66.7%,W2改善率平均值为90.8%,W4改善率平均值为86.5%。依据患者细菌和真菌菌群分析,二路普氏菌（Prevotella bivia）、无乳链球菌（Streptococcus agalactiae）、副流感嗜血杆菌（Haemophilus parainfluenzae）、阴道厌氧球菌（Anaerococcus vaginalis）、凝固拟杆菌（Bacteroides coagulans）等细菌;白色念珠菌（Candida albicans）、腐皮镰刀菌（Fusarium solani）等真菌可能参与了包皮龟头炎的致病过程。结论:1、乳酸菌对于疾病皮肤菌群有一定的调节能力,对包皮龟头炎有较好的症状改善率以及能够改善包皮过长营造的厌氧环境,对于在临床上多见的包皮过长型的龟头炎患者,乳酸菌治疗值得尝试。二路普氏菌（Prevotella bivia）可能是包皮龟头炎的致病菌,而沃氏葡萄球菌（Staphylococcus warneri）可能仅起到辅助致病作用。2、在阴茎龟头和内侧包皮的皮肤屏障功能SH和TEWL上,数值受到包皮长度的影响,覆盖面积越大则SH和TEWL越高。阴茎皮肤表面p H值均为5.5左右,不受检测位点和包皮长度的影响。阴茎龟头、冠状沟、内侧包皮和外侧包皮四个位点在细菌和真菌菌群结构上,外侧包皮是不同于其他位点的,内侧包皮和龟头在各方面比较类似。细菌多见葡萄球菌、棒状杆菌、普氏菌、大芬菌和卟啉单胞菌;真菌多见马拉色菌。3、包皮龟头炎在人群中的发病率,与包皮覆盖的程度无关,但包皮覆盖程度较多的患者,其严重程度普遍较重。龟头和内侧包皮的皮肤物理屏障功能里的表皮含水量可以用来区别疾病或健康状态,患者的表皮含水量下降;皮肤表面p H变化不明显,不受到包皮覆盖程度或者疾病严重程度的影响。依据患者细菌和真菌菌群分析推测,二路普氏菌（Prevotella bivia）、无乳链球菌（Streptococcus agalactiae）、副流感嗜血杆菌（Haemophilus parainfluenzae）、阴道厌氧球菌（Anaerococcus vaginalis）、凝固拟杆菌（Bacteroides coagulans）等细菌;白色念珠菌（Candida albicans）、腐皮镰刀菌（Fusarium solani）等真菌可能参与了包皮龟头炎的致病过程。