放线菌LA5菌株产生的抗真菌抗生素研究

来源 :华南热带农业大学 海南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:fiona_01
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放线菌LA5菌株是一株对辣椒疫霉菌等多种植物病原真菌具有很高拮抗活性的生防菌,其作用机理是产生抗生素。疫霉菌病害是一类世界性分布的重要土传病害,危害作物种类多,流行速度快,损失巨大,目前国内外尚无植物疫病防治用的商品抗生素。研究利用放线菌LA5菌株产生的抗生素,对于植物疫病的无公害持续控制具有重要意义。本项研究对放线菌LA5菌株的分类地位、抗生素LA5的分离纯化、理化性质、对辣椒疫霉菌的作用机制、温室盆栽防治效果及抗菌谱等几个方面进行了初步研究一系列研究,结果如下: 1.利用传统分类法初步明确了菌株LA5的分类地位。通过对菌株LA5的形态特征、培养特征、生理生化特性、培养条件和拮抗性研究,判断菌株LA5属于诺卡氏菌形放线菌(Nocardioform Actinomycetes)。诺卡氏菌型放线菌是指那些形态上具有初生菌丝体,并多少呈规律性断裂成球状或杆状小体的一类G~+放线菌。 2.用离子交换层析和结晶法相结合分离获得了抗生素LA5的结晶体并初步判断抗生素LA5为一核苷类抗生素。分析认为抗生素LA5属于碱性水溶性抗生素。选用离子交换法分离抗生素,得到抗生素LA5的粗品,采用结晶法,得到抗生素淡黄色柱形结晶体。对抗生素结晶进行紫外分析,其吸收峰与典型的核苷类抗生素吸收峰极为相似,因此,可初步判断抗生素LA5为核苷类抗生素。抗生素LA5在中性及微碱性的条件下稳定,室温条件下存放半年活性开始下降。抗生素LA5对光稳定,54℃ 15天抗生素LA5的抑菌活性基本与对照相同。采用比色法对发酵20天的发酵液中抗生素的化学效价进行估计,化学效价为46μg/ml。 3.抗生素LA5对对辣椒疫霉病菌的作用机制研究表明,抗生素LA5同时具有抑菌和杀菌功能。用抗生素LA5处理的辣椒疫霉菌丝形态显著变化,菌丝肿胀、变短,细胞壁丧失完整性,细胞膜则近乎消失,仅遗留少量皱缩的残余物和巨大的脂类贮存颗粒。紫外分光光度法测定证明抗生素LA5的作用位点不在病菌的细胞膜上,其作用机制可能是具有与碱基类似结构的抗生素干扰病菌DNA的合成。抗生素LA5能抑制辣椒疫霉产生游动放线菌LAS菌株产生的抗真菌抗生素研究抱子囊,并抑制游动抱子的释放及萌发。较高浓度的抗生素LAS对抱子有直接杀灭作用。 4.抗生素LAS温室防效试验证明,抗生素LAS对辣椒疫病病的抑菌效果比较理想。发醉液浓缩10倍,其防治辣椒疫病的防效略好于常用农药2界甲霜灵份P60O倍液,但不及2界甲霜灵wP400倍液。 以上研究结果表明,抗生素以5作用机制比较特别,室内防治效果高,在作物真菌病害防治方面展示了诱人的前景,具有进一步开发成植物真菌病容防治用药剂的价值。
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