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目的:
本实验通过检测相关指标,阐明化浊通脉散治疗ASO的作用靶点,进一步从分子生物学角度探讨化浊通脉散治疗ASO的作用机理。进而为临床治疗下肢动脉硬化闭塞症及开发新药提供科学依据。
方法:
一、造模
选用纯种新西兰雄性白兔50只,10月龄,体重2.8-3.0公斤。实验前适应性喂养1周,排除饮食异常者。随机分为5组,每组10只:即正常组(A)、模型组(B)、化浊通脉散组(C)、西洛他唑组(D)、通塞脉片组(E),分笼饲养。正常组喂养普通饲料,自由饮水。其余四组自实验开始喂高脂饮食,每只每日在正常饲料中加胆固醇1g、猪油5g。第三天开始均在10%乌拉坦麻醉下由左侧股动脉插管,4F气囊导管拖拉右侧髂股动脉8次,造成机械性内膜损伤。实验第7天模型组、实验组,对照组,经耳缘静脉一次性注射牛血清白蛋白250 mg/kg造成内皮损伤,正常组注射等量生理盐水。
二、取材及制定标本
各组动物于治疗前后分别取外周静脉血5ml,制备血清标本,测定血脂(TG、TC、LDL-C、HDL-C)。实验结束后用乙醚麻醉动物,解剖切取股动脉,长约0.2-0.3cm,放到盛有1ml Trizol的1.5ml EP管中保存。利用RT-PCR检测取材标本中血小板衍化生长因子(PDGF-a、PDGF-b)相关指标的含量。
结果:
化浊通脉散能有效的降低血脂如TC、TG、LDL-C,但升高HDL-C作用不明显,利用RT-PCR检测PDGF-a、PDGF-b的mRNA表达情况,各项指标化浊通脉散组均比西洛他唑组、通塞脉片组及模型组降低。
结论:
化浊通脉散能有效降低动脉硬化血管中PDGF-a、PDGF-b的表达量,还能降低血脂,如TC、TG、LDL-C。因此具有保护动脉血管内膜,抑制动脉粥样硬化形成的作用。