小冰麦33抗叶锈性鉴定及SSR和TRAP分析

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小麦叶锈病是小麦生产上的重要病害之一,筛选和培育抗病品种已被公认是防治此病害最为经济、安全和有效的途径。而了解我国小麦栽培品种以及重要抗源材料的抗病基因组成和遗传特点是合理利用抗病品种的基础。小冰麦33是上世纪90年代由东北师范大学与吉林省农科院作物育种研究所合作通过异位附加系等方法将468-6-7与新曙光1号杂交育成的著名小麦品种。被农业部列为国家级的优质小麦,为一种高产、高蛋白、多抗病的小麦新品种,在抗病育种和生产上具有重要的应用价值。并于1995年审定推广,目前已在北方许多省份得到大面积推广。本研究以小冰麦33为材料,应用温敏抗叶锈性基因推导、成株期抗叶锈性基因推导、抗性遗传分析和分子标记辅助选择、SSR技术、TRAP技术对小冰麦33抗叶锈性进行研究。1.利用温敏基因推导法,通过比对小冰麦33及7个温敏抗叶锈近等基因品系对4个叶锈菌生理小种的抗病反应型,推导出小冰麦33可能含有Lr18及其他新的温敏抗叶锈性基因。研究同时证明温敏抗叶锈性基因具有小种的专化性。2.利用成株期基因推导法,通过比对小冰麦33及9个成株期抗叶锈近等基因品系对13个不同毒力的叶锈菌生理小种的抗病反应型,推导出小冰麦33不含有本试验中所测试的Lr12、Lr13、Lr14a、Lr14b、Lr22a、Lr22b、Lr34、Lr35、Lr37这9个成株期抗叶锈基因,可能含有其他成株期抗叶锈性基因及未知基因。3.运用了33个小冰麦33 F3代家系接种04-5-32I叶锈菌生理小种进行遗传分析,其分离比经卡方适合性测验符合由一对显性基因控制的3:1分离比例(x2=0.03<x20.05=3.84),初步表明了小冰麦33对04-5-32I的抗性由一对显性基因控制。4.利用微卫星技术和分离群体分组法(BSA)对小冰麦33抗01-5-X-15A叶锈菌生理小种的抗叶锈基因进行了标记,从406对SSR引物中筛选出一对位于2B染色体上的引物wmc474,此引物在小冰麦33/Thatcher F3群体建立的抗、感基因池中扩增到一条大小约为110bp的差异性DNA片段,经F3代小群体验证后,得出遗传距离为38cM。5.利用TRAP技术对小冰麦33进行了标记,最后发现引物对em8-fix1在438bp处揭示了小冰麦33与抗病亲本Thatcher之间的差异性,经51个近等基因验证后,发现小冰麦33与TcLr3、TcLr46具有相同的438bp扩增片段。6.通过优化试验条件,建立了一套稳定性较好,重现性较高适合于小麦抗叶锈基因STS或SCAR分子标记的程序,并对部分STS或SCAR标记进行了特异性验证。用与抗叶锈基因连锁且特异性较好的STS或SCAR标记对小冰麦33进行分子辅助鉴定,扩增结果表明小冰麦33不含有Lr1,Lr28,Lr41抗叶锈基因,含有Lr34抗叶锈基因。本试验通过多种方法发现了小冰麦33是一个含有多抗叶锈基因的品种,可作为重要抗源选育抗病品种,易于实现所育品种抗性的“多基因屏障”,能够有效防止品种抗病性“丧失”。
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