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背景:先天性肌营养不良(congenital muscular dystrophy,CMD)为一类复杂的神经肌肉病,是出生时或生后数月内出现的原发性、进行性肌病。本组疾病的共同特点是出生时或出生后不久表现全身严重的肌无力、肌张力低下以及骨关节挛缩,腱反射减弱或消失,血清肌酸肌酶(CK)不同程度升高,肌电图(EMG)呈肌源性损害,肌肉活检病理组织学提示肌营养不良改变,即肌纤维大小不等,可见小圆状发育不良的肌纤维,间质结缔组织增生,有正常的抗肌萎缩蛋白(dystrophin)分布,无明显超微结构特殊变化。目前国际上将CMD分为三大类(表1-1)。CMD致残率和致死率高,给家庭和社会带来沉重负担。目前这类疾病的诊断主要依靠临床表型,肌活检组织学检查是确诊的依据。我国仅有数例CMD的临床个例报道,缺乏分子病理及分子遗传学方面的资料。目的:对北京大学第一医院儿科收集的15例CMD患儿进行表型分析、分子病理及致病基因筛查研究,了解我国部分类型CMD患儿的临床特点,建立部分类型CMD的诊断方法,并为部分类型CMD患者的遗传咨询及产前诊断打下基础。方法:对北京大学第一医院儿科收集的15例(男11例、女4例)CMD患儿的临床表现、血清CK水平、EMG、头颅MRI等特点进行分析总结,将受试对象分为先天性肌营养不良1A型(12例)及肌-眼-脑病(3例)两组,对其中部分病人进行肌肉活检、常规病理学检查,并采用单克隆抗人层粘连蛋白α2(lamininα2,又称merosin)抗体、抗α-抗肌萎缩相关糖蛋白(α-dystroglycan,α- DG)糖链抗体ⅡH6、抗β-抗肌萎缩相关糖蛋白(β-dystroglycan,β- DG)抗体、抗肌萎缩蛋白(dystrophin)C-末端(Dys-C)单克隆抗体行活检肌肉免疫组织化学染色。对于肌-眼-脑病组病例在签署知情同意书的前提下采集外周血5ml提取DNA,运用聚合酶链反应(PCR)扩增目的基因编码区序列和DNA直接测序的方法进行肌-眼-脑病致病基因POMGnT1、FKRP、FCMD、POMT2突变分析。全部工作均在北京大学第一医院儿科研究室以及神经病理实验室完成。结果:1、12例先天性肌营养不良1A型患儿中有6例进行了肌肉活检,临床均表现为生后～4个月内发病,运动发育里程碑延迟,关节挛缩显著,肌力、肌张力低下,腱反射减弱或消失。辅助检查均表现为:血清CK水平呈10～50倍增高,EMG呈肌源性损害,头颅MRI示脑白质信号异常。6例患者肌肉活检病理诊断符合肌营养不良。采用特异抗体行活检肌肉免疫组织化学染色,显示均为merosin染色阴性,α- DG、β-DG、Dys-C呈阳性表达。另外6例患儿缺少病理资料,但临床表现与辅助检查结果与以上6例患儿完全相似。2、3例肌-眼-脑病患儿中有2例进行了肌肉活检,临床均表现为生后～1个月内发病,智力落后、运动发育里程碑延迟以及肌营养不良表现:肌力、肌张力低下、关节挛缩、腱反射消失。辅助检查均表现为:血清CK水平显著增高,EMG呈肌源性损害。特征性表现:均存在眼部异常及脑畸形,包括注视差、对光反应迟钝、视神经萎缩,以及头颅MRI显示小脑多发小囊灶、脑干发育不良。2例患儿肌肉活检病理诊断符合肌营养不良,采用特异抗体进行活检肌肉免疫组织化学染色,显示均为抗α-DG糖链抗体ⅡH6染色阴性,β-DG、merosin、Dys-C呈阳性表达,提示存在α-DG糖基化缺陷,支持了抗肌萎缩相关糖蛋白病的诊断。另外1例患儿缺少病理资料,但临床表现与辅助检查结果与以上2例患儿完全相似。3例患儿均进行了肌-眼-脑病致病基因POMGnT1、FKRP、FCMD、POMT2突变分析,基因筛查发现了31个单核苷酸多态(single nucleotide polymorphisms,SNPs)及5个同义突变(samesense mutation),4个基因均未发现编码区的致病突变。结论:我们在国内首次从临床及分子病理水平确诊了6例MDC1A和2例抗肌萎缩相关糖蛋白病患儿;初步明确了我国MDCIA患儿的临床特点;在国内首次建立了部分先天性肌营养不良的临床、分子病理及分子遗传学诊断方法。