研究背景:肝纤维化是慢性或反复性肝损伤的常见病理生理学过程,其特征表现为大量肝实质细胞的损伤和死亡,被过度产生的纤维组织所取代,其间伴随肝脏正常结构破坏和肝功能丧失,而持续的肝纤维化是诱发肝硬化、甚至肝癌的危险因素之一。肝移植是肝纤维化终末期肝衰竭治疗的唯一有效手段,然而,有限的肝脏来源和高昂的医疗成本限制了其应用。大量的研究表明,肝纤维化的发生发展牵涉到肝脏失控的炎症反应和氧化应激,进一步刺激肝星状细胞的活化,导致的细胞外基质过度沉积。尽管对肝纤维化的发病机制研究取得一定的进展,但到目前为止,临床上对其仍然缺乏有效的治疗药物。因此,寻求新的治疗靶点并在此基础上探索有效的治疗药物显得尤为重要。吴茱萸碱是植物吴茱萸的生物活性碱成分,具有抗炎镇痛、抗氧化等药理作用。但是由于吴茱萸碱完全不溶于水,所以限制了其临床应用。因此,在本研究中,探索了使用纳米脂质体作为药物输送载体递送吴茱萸碱的方法,并评估了其对小鼠肝纤维化的保护和治疗作用。目的:本研究旨在评估吴茱萸碱纳米脂质体对四氯化碳（CCl₄）和硫代乙酰胺（TAA）诱导的小鼠肝纤维化的保护作用及其潜在机制。方法:1.吴茱萸碱纳米脂质体的制备及其表征评价采用薄膜分散法并以胆固醇、氢化大豆卵磷脂（HSPC）和吴茱萸碱为原料制备吴茱萸碱纳米脂质体。并使用马尔文粒径仪检测所得的吴茱萸碱纳米脂质体的粒径（Size）、电位（Zeta）和分散系数（PDI）;透射电子显微镜观察其外观;傅立叶红外检测其红外光谱图;紫外分光光度仪计算其包封率和载药量;高效液相-质谱联用检测实验小鼠的血清和肝脏中吴茱萸碱的含量,以评价吴茱萸碱和吴茱萸碱纳米脂质体的生物利用度。2.吴茱萸碱纳米脂质体对CCl₄/TAA诱导的小鼠肝纤维化的保护作用将36只C57BL/6小鼠随机分为6组:空白组（Blank组）、吴茱萸碱纳米脂体（100 mg/kg）对照组（Evo组）、CCl₄模型组（CCl₄组）、TAA模型组（TAA组）、CCl₄+吴茱萸碱纳米脂质体（100 mg/kg）组（CCl4+Evo组）、TAA+吴茱萸碱纳米脂质体（100 mg/kg）组（TAA+Evo组）。CCl₄和CCl₄+Evo组腹腔注射CCl₄,TAA和TAA+Evo组腹腔注射TAA,以上均每周三次,共八周,其余两组腹腔注射生理盐水做对照。从第四周开始,CCl₄+Evo组、TAA+Evo组和Evo组按100mg/kg灌胃给予吴茱萸碱纳米脂质体,每周三次,共五周。同时,其余三组给予等体积0.5%羧甲基纤维素钠（CMC-Na）溶液。八周后,收取小鼠血清和肝组织。通过测定小鼠血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）和天门冬氨酸氨基转移酶（AST）的活性和苏木精-伊红（H&E）染色评价肝损伤程度;天狼星红和Masson染色观察小鼠肝脏的纤维化程度;试剂盒检测超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）的活性和谷胱甘肽（GSH）、丙二醛（MDA）的含量以及氧应激荧光探针-二氢乙锭（DHE）评估氧化应激程度;免疫组织化学法（IHC）检测白介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和总白细胞表面标记物CD45以及免疫荧光法（IF）检测巨噬细胞表面标记物F4/80的表达情况以评估炎症反应程度;IHC检测活化的肝星状细胞表面标记物?-SMA的表达情况;蛋白质印迹法（WB）检测GAPDH、含吡喃结构域的3（NLRP3）、凋亡相关斑点样蛋白（ASC）、C-半胱天冬酶1（C-Caspase-1）、白介素1?（IL-1?）、转化生长因子β（TGF-β）、Smad2/3、磷酸化Smad2/3（p-Smad2/3）的蛋白表达。结果:1.制备的吴茱萸碱纳米脂质体外观呈类球形且大小均一,其平均粒径为97.9±2.61 nm,平均电位为-35.6±4.23 mV,分散系数为0.146,其载药量为29.9%,包封率为84.8%;吴茱萸碱纳米脂质体在血液中的含量是吴茱萸碱单体的834.36%,吴茱萸碱纳米脂质体在肝脏中的含量是吴茱萸碱单体的789.73%。2.吴茱萸碱纳米脂质体治疗显著降低了ALT、AST活性（P<0.05）并有效减轻了肝细胞坏死情况和肝纤维化程度。吴茱萸碱纳米脂质体有效提高了GSH的含量和GSH-PX、SOD的活性（P<0.05）并降低了MDA含量（P<0.05）和DHE的表达（P<0.05）。3.吴茱萸碱纳米脂质体有效降低了总白细胞表面标记物CD45和巨噬细胞表面标记物F4/80的表达,并显著降低了炎性因子IL-6和INF-α的释放,以及减少活化的肝星状细胞表面标记物?-SMA的表达。4.吴茱萸碱纳米脂质体显著降低了NLRP3、ASC、C-Caspase-1、IL-1?、TGF-β、Smad2/3、p-Smad2/3.结论:吴茱萸碱纳米脂质体通过其抗氧化和抗炎作用对肝脏纤维化发挥肝脏保护作用,这可能与调节NLRP3/TGF-β/Smad信号通路有关。