【摘 要】
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家蚕是一种能吐丝的经过家养驯化的鳞翅目经济昆虫。数千年来,经过不同目的的人工筛选育种,已得到了许多吐丝量大、个体大等具有不同特性的经济品系。因为它的经济价值以及在
【出 处】
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中国科学院研究生院（上海生命科学研究院）
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家蚕是一种能吐丝的经过家养驯化的鳞翅目经济昆虫。数千年来,经过不同目的的人工筛选育种,已得到了许多吐丝量大、个体大等具有不同特性的经济品系。因为它的经济价值以及在鳞翅目昆虫中的代表性,对其分子生物学的研究正方兴未艾。由于家蚕巨大的蛋白合成能力,它也被生物技术领域认为是用来进行异源蛋白表达的良好载体。在这方面取得较好研究成果的,一个是以家蚕转基因为代表的稳定的外源基因表达品系的培育;另一个是以携带异源蛋白基因表达框架的重组家蚕核型多角体病毒接种家蚕幼虫或蛹,从感染的虫体收获重组蛋白的蚕体生物反应器。但总体而言,可用于家蚕的遗传操作技术还比较少,落后于其他生物,需要进一步改进研究。本文一方面对家蚕转外源基因导入方法的电穿孔技术、蚕卵导入外源基因的检测方法以及导入条件进行了系统研究,并用所得到的优化电穿孔条件对所构建的两组用于家蚕转基因的载体系统进行了测试;另一方面,利用AcMNPV 能感染部分家蚕品系的能力以及丝腺合成、分泌蛋白的巨大能力,构建了一个方便下游分离纯化的丝腺特异分泌表达外源基因的生物反应器系统。 第一章研究结果表明,向蚕卵导入的外源基因在新孵化的蚁蚕中可通过PCR 方法检测,在三龄蚕中可通过PCR 产物的Southern 杂交检测。导入时进入蚕卵的外源基因比率是随蚕品种及电压的不同而变
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