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背景:
卵巢恶性肿瘤是妇科三大恶性肿瘤之一,是妇科肿瘤中病死率最高的一种恶性肿瘤。由于卵巢在体内所处的位置及特殊的组织结构特点,卵巢癌的早期诊断比较困难,其中大约70%的患者就诊时已属晚期。
整合素是一类介导细胞与细胞外基质及细胞与细胞间黏附的细胞黏附分子受体。αvβ6(integrinαvβ6)是整合素家族的一员,参与肿瘤的发生、发展与转移。基质金属蛋白酶(MMPs)家族的主要功能是降解细胞外基质成份。MMP-9作为Ⅳ型胶原酶,不仅能降解细胞外基质(ECM),还与整合素家族等细胞表面黏附分子结合,促进肿瘤侵袭与扩散。整合素可调控金属蛋白酶的表达,在降解破坏基质和肿瘤侵袭中起重要作用。研究显示卵巢上皮癌细胞可通过其表面的细胞黏附因子介导的信号传导加强金属蛋白酶的释放,加速肿瘤转移过程。
本课题检测卵巢上皮癌组织和正常卵巢组织中整合素αvβ6、MMP-9在基因和蛋白水平上的表达情况,探讨两者与卵巢上皮癌临床病理特征的关系,并初步分析两者的相关性。研究αvβ6、MMP-9在卵巢上皮癌中的表达与功能,有助于进一步认识卵巢癌侵袭转移的分子机制,有可能为恶性肿瘤的早期诊断和预后判断提供新的指标,为肿瘤治疗提供理论依据。
材料和方法:
选择我院妇瘤科行手术治疗的卵巢上皮癌冷冻组织、石蜡标本46例及正常卵巢组织10例作为对照。采用半定量RT-PCR方法及免疫组化法检测卵巢上皮癌组织及正常卵巢组织中αvβ6、MMP-9的表达水平。分析卵巢上皮癌组织中两因子的表达与临床病理特点的联系,探讨两因子之间有无相关性。应用SPSS12.0软件对实验数据进行统计分析。采用t检验和x2检验,两者相关性采用Spearman相关分析。P<0.05为差异有统计学意义。
结果:
1、整合素αvβ6、MMP-9在卵巢上皮癌、正常卵巢组织中的表达
卵巢上皮癌组整合素αvβ6、MMP-9表达率分别为100%、92.7%,表达强度分别为0.895±0.189、0.36±0.126。10例正常卵巢组织中,均不表达整合素αvβ6,2例MMP-9低表达,8例不表达。经t检验和x2检验,整合素αvβ6、MMP-9的表达有统计学意义(P<0.01)。
2、整合素αvβ6的表达与临床病理特征的关系
整合素αvβ6阳性表达率及表达相对含量均随肿瘤分期的增加而增高,病情有进展的患者高于无进展的患者,原发灶明显高于转移灶,差异有显著性(P<0.05)。癌瘤残余灶>2cm的患者,其αvβ6的表达稍高于残留灶≤2cm的患者,但二者比较,差异无显著性意义。整合素αvβ6表达在患者年龄、组织类型、分级等方面比较,差异无显著性意义(P>0.05)。
3、MMP-9的表达与临床病理特征的关系
MMP-9在卵巢上皮癌Ⅲ、Ⅳ期中的表达明显高于Ⅰ、Ⅱ期,差异有显著性(P<0.05)。病情有进展的患者阳性表达率高于无进展的患者,差异有显著性(P<0.05)。原发灶与转移灶无明显差别。MMP-9表达在患者年龄、组织类型、分级、残余灶直径大小等方面比较,差异无显著性意义(P>0.05)。
4、整合素αvβ6与MMP-9表达的相关性
结果显示卵巢上皮癌中整合素αvβ6的表达与MMP-9的表达呈正相关(r=0.801,P<0.01),整合素αvβ6高表达组中,MMP-9表达水平高于低表达组(x2=7.563。P<0.05)。
结论:
本研究通过RT-PCR和免疫组化的方法分别从基因和蛋白水平上检测了卵巢上皮癌组织和正常卵巢组织中整合素αvβ6与MMP-9的表达情况,发现在卵巢上皮癌组织中整合素αvβ6出现表达,MMP-9的表达上调,说明整合素αvβ6和MMP-9在上皮性卵巢癌的生长和转移过程中发挥着重要作用。整合素αvβ6与MMP-9的表达随肿瘤分期的增加而增高,与病情进展有关,与年龄、肿瘤类型、组织分级、残余灶直径大小无关,提示两者均参与卵巢癌细胞的侵袭与转移,可作为判断预后的标记物。卵巢上皮癌MMP-9的表达与αvβ6的表达之间有明显的相关性,整合素αvβ6可上调卵巢上皮癌MMP-9的表达。