猪肉中单核细胞增生李斯特菌的分离与耐药性筛查

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单核细胞增生性李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)是一种常见的食源性致病菌,会导致严重的人畜共患病。WHO将其与大肠杆菌O157:H7、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌并列为四大食源性致病菌。该菌为革兰氏阳性菌,在环境中分布广泛,如工厂设备、污水、食物及人和动物的粪便中。单核细胞增生李斯特菌能引起脑膜炎败血症等李斯特菌病,易感人群主要是老人、小孩和孕妇,死亡率达40%以上。自1988年首次报道一株来自法国脑膜炎患者身上的多重耐药单核细胞增生李斯特菌以来,此后不断的从食物、环境、人、动物体内分离到对一种或多种抗生素耐药的单核细胞增生李斯特菌。随着人们生活质量的提高,猪肉及肉制品因其营养丰富成为餐桌上不可缺少的佳肴。但由于肉及肉制品从运输到销售,与外界环境长期接触,导致微生物污染。受到污染的猪肉可通过与人接触使致病菌进入人体内,使人患病。本研究采用传统的生化鉴定方法(GB4789.30~2010)和聚合酶链法(PCR)分离广州市零售市场和超市及厦门某养殖场的猪肉及肉制品中的单核细胞增生李斯特菌;通过PCR研究单核细胞增生李斯特菌的血清型、毒力基因以及四环素耐药机制;采用K-B纸片法检测单核细胞增生李斯特菌对临床使用的17种抗生素的耐药性。研究结果表明273份猪肉及肉制品中有52(19.02%)个样本受单核细胞增生李斯特菌的污染,共检出78株单核细胞增生李斯特菌。33株(42.31%)、24株(30.71%)、16株(20.51%)、3株(3.85%)、2株(2.56%)分别被确定为血清型1/2a(或3a)、1/2b(或3b或7)、1/2c(或3c)、4a(或4c)和4b(或4d或4e)。所有菌株至少含有一个毒力基因,根据菌株含有毒力基因个数将所有分离到菌株分为13组。所有菌株对氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦、亚胺培能、环丙沙星、左氧氟沙星、万古霉素都敏感,耐四环素(20.51%)最严重。11.54%的菌株对临床治疗李斯特菌病的青霉素、庆大霉素、红霉素等抗生素出现耐药。tet(M)基因是单核细胞增生李斯特菌耐四环素的主要机制之一,接合型转座子Tn916与四环素耐药基因tet(M)散播有紧密关系。转座子介导的四环素耐药加速了耐药基因在细菌间的散播,给临床治疗李斯特菌病带来困难。本研究通过研究猪肉及肉制品中单核细胞增生李斯特菌流行情况、耐药性及耐四环素的机制,为预防和控制食源性疾病提供科学的基础。
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