缝匠肌髂骨骨骺瓣修复髋臼软骨发育不良治疗DDH的机制研究

来源 :中国人民解放军医学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yange20092009
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研究目的:发育性髋关节发育不良(developmental dysplasia of the hip, DDH)是儿童骨科常见的髋关节畸形疾病。研究发现,DDH的髋臼软骨存在不同程度的发育不良,病理学观察表现为变性或坏死,从而导致髋臼骨质发育迟缓而形成缺损,如能修复发育不良的髋臼软骨,将可能修复髋臼缺损。有学者曾提出利用外源性软骨细胞修复髋臼软骨发育不良的设想,尚未找到有效的实施方法。儿童时期的髋臼软骨为带有生长板的透明软骨,髂骨骨骺软骨也具备透明软骨的生长特性,二者有相同的组织学结构,因此我们采用缝匠肌髂骨瓣翻转移位术治疗DDH,通过髂骨骨骺软骨修复髋臼发育不良的软骨,进而修补髋臼骨质缺损,临床疗效满意,但其修复机理尚不清楚。研究表明,BMP-2和VEGF两种细胞因子与骨、软骨生长发育密切相关,并在DDH的髋臼软骨中表达相对较弱。本研究拟在建立兔髋关节发育不良模型的基础上,采用兔缝匠肌髂骨骨骺瓣软骨修复髋臼软骨发育不良,通过病理学观察其修复过程,研究BMP-2和VEGF蛋白及mRNA在修复过程中的表达变化,探索髋臼软骨修复的机理,为临床推广应用提供实验及理论依据。研究方法:制备48只日本大耳白兔单侧髋关节发育不良模型,实验组通过缝匠肌髂骨骨骺瓣进行修复治疗,对照组不进行相关治疗,并于术中观察骨瓣的血运情况和拉伸程度。分别于术后1、2、4和8周观察实验组和对照组家兔大体步态和髋关节活动度,并处死动物取髋臼和骨瓣组织进行HE染色以及BMP-2和VEGF的免疫组化染色,Western Blot和实时定量PCR分别检测BMP-2和VEGF蛋白及其mRNA的表达水平。研究结果:术中缝匠肌髂骨骨骺瓣的血运良好,缝匠肌拉伸程度适中;对照组家兔髋关节活动恢复较慢,8周后仍为跛行步态;实验组家兔于术后8周内活动逐渐恢复,8周时步态基本正常;对照组术后1周可见髋臼软骨下骨质缺损,软骨细胞形态基本正常,术后2周髋臼软骨层薄厚不均,术后4周髋臼软骨细胞存在聚集或坏死,术后8周髋臼软骨层仍薄厚不均,但软骨细胞未见明显坏死现象;实验组术后1周可见缝匠肌骨瓣骨骺与髋臼骨组织间存在明显间隙,两者软骨层间距较大,2周骨瓣软骨与髋臼软骨间距逐渐缩短,4周骨瓣软骨与髋臼软骨间距消失,两者趋于融合,至8周骨瓣软骨与髋臼软骨融合;实验组免疫组化染色结构显示BMP-2和VEGF在术后4周时呈强阳性表达并明显高于其他时间点(P<0.05),同时发现1周与2周、8周之间差异具有统计学意义(P<0.05),而其他时间点间未见明显差异(P>0.05):两组髋臼组织中BMP-2和VEGF蛋白的表达与其基因水平相一致,对照组表达水平较低且无明显变化,实验组BMP-2蛋白及其mRNA的表达随时间逐渐升高,从术后2周始见高于对照组(P<0.05),于术后4周时表达达高峰(P<0.01),同时实验组VEGF蛋白从术后2周见高于对照组(P<0.05), VEGF mRNA水平从术后2周高于对照组(P<0.01),VEGF蛋白及其mRNA均在术后4周时升至最高值。研究结论:实验组家兔髂骨瓣软骨与髋臼软骨可发生融合;髂骨骨骺瓣可促进髋臼中BMP-2和VEGF的表达;BMP-2和VEGF蛋白及mRNA表达的增加参与了修复髋臼软骨发育不良的病理生理过程。
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