目的观察ATF4及Beclin1、LC3等自噬相关基因在卵巢癌细胞株A2780及其耐药细胞株A2780/DDP中的表达差异,并探讨ATF4调控细胞自噬逆转卵巢癌耐药细胞株A2780/DDP顺铂耐药的可能机制。方法实时荧光定量RT-PCR、Western blot及细胞免疫荧光检测卵巢癌细胞株A2780及其耐药细胞株A2780/DDP中ATF4、CRY1及自噬相关基因（Beclin1、ATG5、LC3等）的RNA和蛋白表达。分别构建ATF4过表达与CRISPR-Cas9敲除ATF4质粒,病毒介导上述两种质粒及空白对照质粒分别体外转染至卵巢癌顺铂耐药细胞株A2780/DDP细胞并筛选出稳定表达株。RT-PCR、Western blot等实验方法检测各转染细胞株中ATF4、CRY1及自噬相关基因（Beclin1、LC3等）的RNA和蛋白表达差异,自噬抑制剂二磷酸氯喹抑制细胞自噬后检测CRY1及自噬相关基因Beclin1、LC3蛋白的变化情况,蛋白免疫共沉淀验证ATF4与Beclin1是否存在直接作用关系,CCK8实验测定顺铂处理不同转染细胞株的半数抑制浓度（IC50）并计算耐药指数（RI）。结果1.RT-PCR和Western blot检测结果提示ATF4及自噬相关基因（Beclin1、ATG5、LC3等）的表达在A2780/DDP细胞中明显高于A2780细胞,而CRY1在A2780/DDP细胞中的表达明显低于A2780细胞。2.Western blot检测结果提示敲除ATF4后,A2780/DDP细胞中自噬相关基因（Beclin1、ATG5、LC3等）的蛋白表达受到抑制,而CRY1蛋白表达未受影响。过表达ATF4后,A2780/DDP细胞中ATF4、CRY1及自噬相关基因（Beclin1、ATG5、LC3）的蛋白表达有轻微上调,但无统计学意义;P62的蛋白表达下调,有统计学意义（P<0.05）。3.二磷酸氯喹作用于敲除ATF4的A2780/DDP细胞后,细胞中自噬相关基因LC3蛋白累积,细胞自噬受到抑制,Beclin1蛋白表达随之上调;而CRY1表达水平与未使用二磷酸氯喹的细胞比较未见明显差异。4.蛋白免疫共沉淀实验提示在A2780/DDP细胞中ATF4与Beclin1之间存在直接相关。5.CCK8实验结果提示敲除ATF4后,A2780/DDP细胞对顺铂的耐药性明显下降,敏感性明显增强。结论1.RT-PCR、Western blot等不同检测方法从分子与蛋白水平均表明ATF4、自噬相关基因（Beclin1、ATG5、LC3等）及CRY1基因在卵巢癌A2780细胞及其顺铂耐药细胞株A2780/DDP中的表达具有显著差异。2.在卵巢癌顺铂耐药细胞株A2780/DDP中ATF4的高阳性率表达与卵巢癌细胞顺铂耐药具有相关性。3.下调ATF4表达可逆转卵巢癌顺铂耐药细胞株A2780/DDP对顺铂耐药,细胞自噬在这一过程中发挥重要作用。4.CRY1可能参与调控ATF4的表达。