目的:研究和观察糙叶败酱提取物糙叶败酱总木脂素对K562细胞的作用，初步探讨糙叶败酱总木脂素诱导K562细胞凋亡的分子机制。 方法: (1)采用四甲基偶氮唑盐比色法(monotetrazolium test，MTT)测定糙叶败酱总木脂素对K562细胞生长的影响。 (2)采用透射电镜观察经糙叶败酱总木脂素作用后，K562细胞形态变化。 (3)采用流式细胞仪，利用碘化丙啶(propidineiodide，PI)单染法进行DNA含量分析，检测经糙叶败酱总木脂素作用后K562细胞凋亡率；并利用早期凋亡试剂盒Annexin V-FITC和PI双染法测定糙叶败酱总木脂素对K562细胞生长的作用。 (4)采用免疫细胞化学SABC法观察糙叶败酱总木脂素对K562细胞凋亡相关蛋白Caspase-3表达的影响。 (5)采用激光扫描共聚焦显微镜(LCSM)检测糙叶败酱总木脂素对K562细胞线粒体膜电位的影响。 结果: (1)MTT测定结果表明糙叶败酱总木脂素对K562细胞生长有明显的抑制作用，抑制作用随药物浓度增高及作用时间延长而有加强趋势，细胞经400μg/mL糙叶败酱总木脂素作用96h，抑制率为99.38﹪，IC<,50>为21.16μg/mL，与阴性对照组相比较有显著性差异(P<0.01)。 (2)电镜下观察到经400μg/mL糙叶败酱总木脂素作用48h后，一部分K562细胞体积变小，胞浆浓缩，胞核染色质聚集或边集，核碎裂，凋亡小体形成，呈典型的凋亡形态特征。 (3)流式细胞仪检测：通过PI单染，检测到经400μ g/mL糙叶败酱总木脂素作用K562细胞48h后，产生明显的亚二倍体峰，细胞被明显阻滞在G<,1>期，处于S期、G<,2>期细胞明显减少。细胞凋亡率为19.1﹪±2.3，与阴性对照组相比较有显著性差异(P<0.05)。通过Annexin V-FITC和PI双染，检测到经400μg/mL糙叶败酱总木脂素作用K562细胞72h，凋亡细胞占22.1﹪±1.4，与阴性对照组相比较有显著性差异(P<0.05)。 (4)SABC法检测结果表明不同浓度糙叶败酱总木脂素作用于K562细胞24h、48h、72h、96h，K562细胞Caspase-3蛋白的IOD值均增高，与阴性对照组比较有显著性差异(P<0.01)。上调Caspase-3蛋白表达作用随药物浓度增高，及作用时间延长而有加强趋势。 (5)LSCM图像及数据处理结果显示经不同浓度糙叶败酱总木脂素作用K562细胞48h，较阴性对照组，Rh-123平均荧光强度减弱，差异有显著性(P<0.01)。 结论: 1、糙叶败酱总木脂素对K562细胞体外生长和增殖有明显的抑制作用，并呈时间、剂量依赖关系。其机理与细胞的G<,1>期阻滞有关。 2、糙叶败酱总木脂素具有诱导K562细胞凋亡的作用。其作用机理是通过上调caspase-3蛋白的表达，启动凋亡级联反应。 3、糙叶败酱总木脂素可以降低K562~胞线粒体膜电位，启动凋亡反应。