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目的:建立原发性少精症和无精症患者Y染色体微缺失的分子检测方法,应用所建立的方法对原发性少精症和无精症患者及正常生育男性进行Y染色体微缺失的分子检测,确定少精症和无精症患者的缺失率,探讨Y染色体上部分生精基因的缺失与原发性少精症和无精症的关系及其分布规律,为评价这部分患者是否可行ICSI及ICSI成功后是否需要行产前诊断提供实验依据。方法:根据2004年EAA(欧洲男科协会)和EMQN(欧洲分子遗传实验质控网)颁布的第2版Y染色体微缺失分子诊断指南及参考文献,本实验选取Y染色体上AZFa, AZFb, AZFc, AZFd区共8个STS位点,其中选取6个位点进行多重PCR分子检测,2个位点进行单重PCR检测。对51例原发性少精、无精症患者及10例正常生育男性进行Y染色体微缺失的分子检测。结果:1.待测的51份标本、经PCR检测均能检出性别决定基因(Sex-determining region Y, SRY)特异性片段,表明所检测的DNA模板符合要求,整个扩增系统有效。2.SRY基因片段扩增长度为472bp,与待测(AZFa,AZFb,AZFc)相差72-346bp,四者能够区别并以此作为内参照。3. 10名正常生育男性标本均可见SRY,AZFa,AZFb,AZFc扩增带,表明无AZF因子微缺失。4. 51例原发性少精、无精症患者中共发现2例有缺失,缺失率为3.92% (2/51);患者(编号08)检测出sY134缺失,患者(编号为34)检测出sY127缺失,均为AZFb缺失。AZF总缺失率为3.92%(2/51) ,其中无精子症中缺失率为8%(2/25),少精子症中缺失率为0 (0/26)。5.为排除假阳性反应,对这2例标本进行3次PCR单重PCR检测,上述缺失仍无扩增信号,则证实sY127,sY134微缺失的存在。6.51例原发性少精、无精子症患者中AZFd区域无缺失。结论:1.Y染色体微缺失与原发性少精症和无精症有关。在原发性少精﹑无精症患者中Y染色体微缺失的发生率为3.92%。而无精子症中缺失率为8%(2/25),少精子症中缺失率为0(0/26)。2.Y染色体微缺失的缺失位点分布与原发性少精症和无精症有关。本研究中发现的2例AZFb区域缺失患者均为无精子症患者。3.由于Y染色体微缺失有可能通过垂直遗传给男性后代,因此对原发性少精症和无精症患者,在进行人工授精或胞浆内精子注射前,进行相关基因检测,对防止基因缺失传给下一代,提高优生率有着重要的临床意义。4.AZFd区域缺失的类型﹑频率及与少精﹑无精子症的关系应进一步地研究证明。