改性磁性壳聚糖微球固定化乳糖酶的研究

来源 :大连工业大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:saintjob
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磁性高分子微球作为一种新型功能高分子材料,是一种具有磁性纳米复合粒子,在外加磁场的作用下易分离和磁性导向,已在生物化工、细胞学、生物医学工程等领域得到了广泛应用。将高分子壳聚糖和改性磁性纳米粒子结合制备改性磁性壳聚糖微球,具有重要的学术意义和应用价值。壳聚糖表面具有生物活性物质反应的活性羟基和氨基可用做载体,又因其具有磁性,使之在外加电场的存在下能够快速分离。本论文用化学共沉法制备磁流体,对其进行改性后结合壳聚糖制备改性壳聚糖微球固定化乳糖酶。主要的研究内容和结论如下:首先,以FeCl2、FeCl3为主要材料,采用化学共沉法制备磁流体,优化其制备条件。结果表明,当FeCl2与FeCl3的摩尔比为1:1.5、pH为9.0、反应温度为45℃、熟化温度为80℃、10%PEG按磁流体体积2:3比例添加量为30mL时,所制得的Fe3O4具有较强的磁性。其次,研究了改性剂油酸钠对制得的磁流体表面进行改性的最优条件。结果表明,当pH为6.0、温度为80℃、0.1mol/L油酸钠用量按磁流体体积2:3比例为25mL、反应时间为25min时,改性效果最好,制得的纳米粒子稳定性最强。再次,以改性后Fe304磁性粒子为内核,并以液体石蜡为分散介质、Span-80为乳化剂、戊二醛为交联剂,采用反相悬浮交联法制备改性磁性壳聚糖微球(M-CS)。结果表明,当分散剂液体石蜡用量按壳聚糖乙酸溶液体积比例5:2加入16mL时,分散效果最好,当壳聚糖浓度为0.03g/mL、交联剂10%戊二醛按壳聚糖乙酸溶液体积比例5:1加入11mL、搅拌速度为1200r/min时,制得的改性磁性壳聚糖微球具有较大的磁响应,成球效果较好。最后,以改性磁性壳聚糖微球为载体,研究其固定化乳糖酶的最优条件。结果表明,当交联剂0.4%戊二醛按乳糖酶用量1:1的比例加入1.0mL、交联温度为30℃、固定化时间为22h、固定温度为20℃时所得的固定化酶回收率最高。
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