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目的：本实验在已有工作基础上进行了Z—GP—Dox的体内外药效学研究。为下一步拟将开展的体内药代动力学及临床靶向性抗肿瘤药物研究提供可靠的实验依据。
方法：⑴检测前药Z—GP—Dox经FAPα特异性酶解后对4T1细胞毒性的改变。以阿霉素（Dox）为阳性对照，并设定其它对照组，用Z—GP—Dox与NIH3T3/FAPα+细胞株共孵育后的培养上清作用于小鼠乳腺癌细胞株4T1，通过MTT法得到前药水解后对4T1细胞的增殖抑制率。⑵验证原代移植瘤来源HepG—2细胞中FAPα的表达并考察Z—GP—Dox对其作用。采用RT—PCR、Western Blot及免疫组织化学法检测人肝癌HepG—2细胞和其裸鼠移植瘤组织中FAPα的表达情况；以阿霉素（Dox）为阳性对照，设置其它对照组，MTT法检测Z—GP—Dox对FAPα表达的人肝癌HepG—2细胞株的增殖抑制。⑶Z—GP—Dox对BALB/C小鼠4T1移植瘤生长的影响。建立荷小鼠乳腺癌细胞4T1的BALB/C小鼠移植瘤模型，免疫组化验证FAPα的表达情况；以Dox为阳性对照，观察Z—GP—Dox经尾静脉给药的抑瘤作用，给药结束后计算抑制率、观察肿瘤病学变化；并取心脏、肝脏、肾脏、脾脏等脏器进行常规病理学检查，考察Z—GP—Dox对小鼠主要脏器的毒性作用。⑷Z—GP—Dox对BALB/C裸鼠HepG—2移植瘤生长的影响。构建荷人肝癌细胞HepG—2的BALB/C裸鼠移植瘤模型，免疫组化验证FAPα的表达情况；以Dox为阳性对照，考察Z—GP—Dox经尾静脉给药的抑瘤作用以及Z—GP—Dox对小鼠主要脏器的毒性作用。
结果：①前药Z—GP—Dox体外经FAPα特异性酶解后对4T1细胞具有细胞毒性。MTT实验结果显示，Dox对4T1细胞具有明显毒性，而Z—GP—Dox对4T1细胞增殖抑制作用较弱。低浓度几乎没有抑制作用。Dox与NIH3T3/FAPα+细胞共孵育6h后，对4T1细胞的仍具有毒性。但相对于与NIH3T3共孵育后的低细胞毒性，Z—GP—Dox与NIH3T3/FAPα+细胞共孵育后细胞毒性明显增加，与Dox相比，对4T1的抑制率虽然存某些浓度下存在差异，但差异不甚明显。②原代移植瘤来源HepG—2细胞中FAPα的表达及Z—GP—Dox对其作用。RT—PCR和Western Blot结果均显示原代HepG—2细胞中有FAPα的表达，而体外正常培养的HepG—2未检测到FAPα，免疫组织化学结果表明人肝癌HepG—2细胞BALB/C裸鼠移植瘤组织也有有FAPα的表达。③Z—GP—Dox对小鼠乳腺癌的生长具有抑制作用。Z—GP—Dox对荷小鼠乳腺癌4T1皮下移植瘤有明显的抑瘤作用。等摩尔剂量Z—GP—Dox治疗组与Dox组的相对肿瘤增殖率和抑瘤率没有显著性差异。④Z—GP—Dox对裸鼠人肝癌移植瘤的生长具有抑制作用。
结论：⑴体外前体药物Z—GP—Dox在FAPα存在下，可释放出游离阿霉素，使后者的细胞毒性得以恢复，并能有效地抑制肿瘤细胞的增殖。⑵Z—GP—Dox对BALB/C小鼠乳腺癌4T1和人肝癌HepG—2皮下移植瘤有明显的抑瘤作用。⑶Z—GP—Dox同阳性对照组Dox相比没有明显的心肌毒性，也未观察到明显的肝、肾和脾毒性。