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背景/目的:由于现代人饮食结构的变化以及精神和社会压力的增大,便秘已成为困扰人们的主要问题之一,降低了人们的生活质量。便秘人群易出现肠道菌群紊乱,长期便秘还会诱发各种疾病。调查研究发现,大部分便秘治疗药物存在各种各样的潜在副作用。因此寻找一种温和且安全有效的干预措施是非常必要的。大量文献显示益生菌以及膳食纤维都具有润肠通便的作用,所以本研究的主要目的就是建立标准化的洛哌丁胺诱导的大鼠便秘模型,分别使用膳食纤维、益生菌以及益生菌联合膳食纤维对便秘模型进行干预,以探讨益生菌联合膳食纤维对便秘的改善作用及其机制。方法:1)洛哌丁胺腹腔注射(5mg/kg),连续5天,建立大鼠便秘模型,益生菌(2ml/只),膳食纤维(1g/kg),益生菌联合膳食纤维(2ml/只)干预7天。造模5天后,通过观察各组大鼠的粪便性状以及检测其粪便含水率,用以判断造模是否成功。2)碳粉推进率实验检测各组大鼠第12天的小肠推进率。3)利用PCR-DGGE指纹图谱技术分析空白对照组、便秘组、益生菌组、纤维组、益生菌维组肠道菌群多样性的改变。4)ELISA法测定各组大鼠结肠组织样品中VIP、P、Cl-、Ca2+浓度。5)通过Western-blotting实验方法对各组大鼠结肠组织中AQP3、C-Kit进行含量检测。6)RT-PCR实验方法测定各组大鼠结肠组织中PKA、NK1的含量变化。7)应用Na+-K+-ATP酶活性测定试剂盒对各组大鼠结肠组织中Na+-K+-ATP酶活性进行测定。结果:1)第5天造模后模型组大鼠粪便干结呈颗粒状,粪便含水率显著下降(P<0.05),提示造模成功。干预7天后,与经自然恢复的便秘模型组相比各组大鼠粪便含水率以及小肠推进率显著升高,而益生菌+纤维组与单独应用益生菌和纤维相比效果明显。(p<0.01)2)与经自然恢复的便秘模型组相比,益生菌组、纤维组在提高VIP、P、Cl-、Ca2+水平上效果显著(P<0.05),益生菌+纤维组可更有效提高该四种指标的浓度(p<0.05),益生菌+纤维组与益生菌和膳食纤维组相比具有显著性差异,而益生菌组和纤维组之间差异不明显,便秘组与空白对照组在该三种指标水平上有显著差异(p<0.05)。3)与经自然恢复的便秘模型组相比,益生菌组、纤维组、菌+纤维组可有效增加结肠组织中AQP3以及C-kit蛋白的表达(P<0.05),其中菌+纤维组效果更明显(P<0.05)。4)益生菌组、纤维组、益生菌+纤维组均可提高PKA以及NK1 m RNA的表达量(p<0.05),纤维组与益生菌组效果更明显(p<0.05),益生菌+纤维组效果比单独应用益生菌和纤维组效果更显著(p<0.05)。5)与空白对照组相比,便秘模型组Na+-K+-ATP酶活性下降明显(P<0.05)。与经自然恢复的便秘模型组相比,益生菌组、纤维组、菌+纤维组Na+-K+-ATP酶活性显著上升(P<0.05),其中菌+纤维组效果更明显(P<0.05)。结论:益生菌和膳食纤维均可不同程度的改善便秘,而益生菌+膳食纤维可显著改善便秘。