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目的:探讨TIRC7与急性GVHD的相关性及TIRC7分子在急性GVHD发生发展中的作用和可能的机制。方法:(1)分别获取急性GVHD患者治疗前后的外周血血浆及单个核细胞等样本,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)及实时定量聚合酶链式反应(q-PCR)等方法,检测TIRC7及CTLA-4在急性GVHD患者治疗前后的指标变化,明确TIRC7及CTLA-4与急性GVHD的相关性。(2)应用流式细胞术及蛋白印迹(Western blot)等检测手段,选择急性GVHD患者淋巴细胞作为靶细胞,采用质粒构建及电穿孔等方法,观察TIRC7对CTLA-4的调控、T细胞活化及其对细胞因子分泌等的影响。(3)以SPF级C57BL/6鼠为供鼠,BALB/c鼠为受鼠,参照本实验室成熟的建模方案建立小鼠急性GVHD模型。腹腔注射TIRC7及CTLA-4单克隆抗体,并观察在小鼠急性GVHD模型中,TIRC7及CTLA-4对T细胞活化及急性GVHD的影响。结果:(1)我们应用RT-PCR及western blot方法检测到急性GVHD患者TIRC7及CTLA-4的表达。ELISA及q-PCR方法发现急性GVHD患者TIRC7表达较正常人升高,在治疗后28 d,其表达均有不同程度下降,且其表达水平与急性GVHD严重程度呈正比;急性GVHD患者CTLA-4表达下降,在治疗后28 d,其表达均有不同程度回升,且其表达水平与急性GVHD严重程度呈反比。(2)下调TIRC7表达后,CTLA-4的表达下降,STAT3荧光素酶报告基因质粒的荧光素酶活性显著下降,STAT3磷酸化程度降低;上调CTLA-4表达,TIRC7表达变化不明显,STAT3荧光素酶活性显著升高,STAT3磷酸化程度升高。上调CTLA-4表达可显著抑制T细胞活化,IFN-γ、IL-17及IL-22等细胞因子水平均出现不同程度地下降;小干扰质粒pGPU6-shTIRC7感染靶细胞后,T淋巴细胞活化能力增强,IFN-γ等细胞因子分泌增多。(3)我们成功建立轻-中度及重度急性GVHD小鼠模型。与TIRC7/CTLA-4单一给药组及未给药组比较,TIRC7及CTLA-4联合给药组小鼠急性GVHD评分最低,平均生存时间最长,造血重建恢复时间最短。从移植后7 d开始,实验组小鼠肝脏、肺脏及肠道等重要脏器均出现不同程度地急性GVHD病理改变。随着移植时间的推移,各受累脏器病理改变逐渐严重,其中肠道病理损伤在移植后14 d达到高峰,肝脏及肺脏病理损伤在移植后21 d达到高峰,以后各脏器损伤程度逐渐减轻。在移植后7 d,实验组小鼠急性GVHD各脏器病理损伤各组间比较均无显著性差异。而在移植后14 d、21 d、28 d和35 d四个时间点,TIRC7及CTLA-4联合给药组受鼠肝脏、肺脏及肠道病理损伤程度最轻。随着移植时间的迁移,小鼠急性GVHD各受累脏器病理评分逐渐升高,在移植后14-21 d达到顶峰,然后逐渐降低。在移植后14 d、21 d、28 d和35 d四个时间点,TIRC7及CTLA-4联合给药组受鼠各脏器病理评分最低。结论:(1)急性GVHD患者TIRC7表达升高,且急性GVHD程度越严重,TIRC7表达水平越高;急性GVHD患者CTLA-4表达下降,且急性GVHD程度越严重,CTLA-4表达水平越低。(2)TIRC7可能通过正向调控CTLA-4功能,抑制T细胞的活化及细胞因子的分泌,负向调控急性GVHD的发生发展。(3)初步证实腹腔注射TIRC7/CTLA-4单克隆抗体后,小鼠急性GVHD程度减轻。