microRNA-193调控低能激光促骨髓间充质干细胞增殖过程的研究

来源 :温州医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zjzzhength
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缩短骨髓间充质干细胞(MSCs)的培养周期有利于增加临床干细胞使用数量,减少细胞污染,缩短培养时间,并改善临床提供干细胞患者老龄化引起的增殖能力的降低的现象,对于临床干细胞的制备显得尤为重要。本实验通过低能激光(LLLI)处理骨髓间充质干细胞促细胞增殖,用芯片筛选参与调控的miRNA,并对其作用机制和具体作用通路进行研究。在我们前期实验中已证明,低能激光能够调控MSCs的增殖能力,但该过程的具体机制不是很明确。miRNA参与干细胞各个方面功能的调控过程,而相关miRNA是否参与低能激光促MSCs增殖过程及其具体机制尚未见报道。  本实验发现,低能激光能造成大鼠骨髓间充质干细胞增殖能力增加,以第2天及第4天为著,细胞周期调控蛋白在激光照射后也发生了与增殖能力相应的改变。为明确在低能激光处理后发生变化的miRNA,经芯片筛选发现34个miRNAs在低能激光处理后发生了变化,运用靶点数据库及生物信息学分析,我们将其中6个miRNA作为候选miRNA。经qRT-PCR验证发现这些miRNA的变化呈现一定的时间变化趋势,其中变化最明显的是miR-193,它的变化与MSCs的增殖能力呈现一定的相关性。为明确miR-193的功能,经miRNA转染过表达及抑制实验发现miR-193能够调控大鼠的MSCs的增殖能力,但不影响细胞的分化和凋亡能力。通过qRT-PCR检测发现miR-193能够调控细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)的表达,而CDK2是调控细胞周期变化的一个重要因子。  总之,本实验发现miR-193在低能激光促骨髓间充质干细胞增殖过程中起关键作用。本结果为临床制备干细胞研究提供了新的治疗方法,并为低能激光治疗提供了新的研究机制。
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