EB病毒核酸及其编码的microRNAs与儿童过敏性紫癜发生的关系分析

来源 :苏州大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:zm4910588
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目的:探讨EB病毒在儿童过敏性紫癜(HSP)中的感染情况,分析EB病毒编码的microRNAs在儿童HSP中的表达,并进一步了解EB病毒核酸及其编码的microRNAs与HSP发生的关系。方法:①采用回顾性调查方法,选取2011年9月至2017年1月在苏州大学附属儿童医院确诊的212例儿童HSP患儿为研究对象,将111例肾病综合征患儿和208例肺炎患儿作为疾病对照组。统计三组患儿临床资料和EB病毒DNA测定的结果,分析三组疾病全血中EB病毒DNA 阳性检出率及病毒载量表达的差异,所有数据经统计学方法处理,从而探究EB病毒感染与儿童HSP的发病关系。②采用疾病对照的方法,选取本院确诊的HSP患儿为研究对象,将肺炎患儿作为疾病对照组,并将同期在本院体检的健康儿童作为健康对照组。用实时荧光定量PCR方法检测三组儿童全血中的EB病毒DNA载量。选取EB病毒DNA 阳性的病例用实时荧光定量PCR方法检测全血中EBV编码的microRNAs的表达情况。用血清学方法检测HSP患儿EBV抗原特异性抗体从而了解感染状态(潜伏感染和活动感染)。结果:1、EB病毒阳性检出率及病毒核酸的检测:①三组中EBV 阳性检出率分别为HSP组(52.83%),肾病综合征组(36.04%),肺炎组(24.04%),各组间差异有统计学意义(P<0.05),其中HSP组相对于其他两组对照组,血液EBV DNA表达阳性率最高。②三组患儿男女发病率比分别为HSP组(1.33:1),肾病综合征组(2.47:1),肺炎组(1.48:1),男性发病率均普遍高于女性,各研究组EBV在不同性别中的阳性检出率差异无统计学意义(P>0.05)。③三组发病率最高的年龄组分别为HSP组7~10岁(学龄期)(42.92%),EBV DNA阳性检出率也最高(60.44%);肾病综合征组3~6岁(学龄前期)(43.24%),阳性检出率也最高(39.58%);肺炎组3~6岁(学龄前期)(45.67%),阳性检出率也最高(27.37%)。不同疾病组间3~6岁与7~10岁年龄组阳性检出率差异有统计学意义(P<0.05),χ2分别为8.633和18.213。其余各年龄组阳性检出率差异无统计学意义(P>0.05)。④肺炎组EBV DNA载量表达高于HSP组(P<0.001),也高于肾病综合征组(P<0.001)。HSP组与肾病综合征组EBV DNA载量表达差异无统计学意义(P=0.297)。HSP与肾病综合征组EBVDNA载量在1.0×102~1.0×103copies/ml区间所占比例最大,肺炎组病毒载量在1.0×03~1.0×104copies/ml区间所占比例最大,各研究组不同载量分布区间差异有统计学意义。2、EB病毒编码的microRNAs的检测:本部分共得到EB病毒DNA表达阳性的HSP患儿93例,肺炎患儿78例以及健康携带者30例。对阳性病例进行分析:①各研究组EB病毒DNA载量分布为1.0×102~1.0×105 copies/mL。各组病毒载量以低拷贝数为主,且病毒载量组间分布差异无显著性(P>0.05)。②血清EB病毒抗原特异性抗体检测结果示HSP组EBV潜伏感染75例(80.65%),EBV活动感染18例(19.35%);肺炎组EBV潜伏感染58例(64.10%),EBV活动感染20例(35.90%)。③HSP组全血中EBV编码microRNAs的表达水平均明显高于健康携带者(P<0.05),其中miR-BART3-3p 的表达水平最高。HSP 组中 miR-BART3-3p、1-5p、10-5p、12、13-3p、16-1的表达水平显著高于肺炎组(P分别=0.04、=0.029、=0.016、=0.001、=0.041、<0.001);miR-BART5-3p、6-5p在HSP组中可以检测到,而在肺炎组及健康携带者中并未检测到。④不同感染状态下,HSP组EBV活动感染患儿全血EBV-miRNAs中miR-BART1-5p、13-3p的表达水平明显高于潜伏感染患儿(P分别=0.045、=0.032),肺炎组中EBV活动感染患儿全血EBV-miRNAs中miR-BART10-5p、16-1的表达水平明显高于潜伏感染患儿(P分别=0.023、=0.042),两组其他可检测到的miRNAs在潜伏感染和EBV活动感染患儿的表达水平无显着性差异(P>0.05)。⑤潜伏感染状态下,HSP组全血EBV-miRNAs中miR-BART7-3p、13-3p的表达水平明显高于肺炎组(P分别=0.006、=0.008),也明显高于健康携带者(P分别=0.021、=0.001);HSP组潜伏感染全血中EBV-miRNAs的表达普遍高于健康携带者(P<0.05),而肺炎组中仅miR-BHRF1-1、1-2-3p,及 miR-BART3-3p、16-1、8-5p、9-3p、11-3p、12、19-3p 的表达高于健康携带者(P值分别<0.001、<0.001、=0.035、=0.001、=0.020、=0.001、=0.003、=0.001、=0.005)。⑥EBV 活动感染状态下,HSP 组的 miR-BHRF1-2-5p,及miR-BART3-5p、1-5p、9-3p、13-3p 的表达显著高于肺炎组(P 值分别=0.028、=0.034、=0.001、=0.032、=0.013),其他各miRNAs的表达在HSP组和肺炎组差异无统计学意义(P<0.05)。结论:1、EBV感染与HSP的发生密切相关,尤其是潜伏感染的EBV参与的免疫机制可能是诱发HSP发生的重要因素。2、EBV编码的miRNAs:miR-BART13-3p、7-3p、8-5p、3-5p、11-3p、19-3p、5-3p、6-5p 及 miR-BHRF1-1、1-2-3p、1-2-5p 可能与HSP的发生相关;潜伏感染状态下差异表达的miR-BART 13-3p和7-3p,以及HSP中独有表达的miR-BART 5-3p和miR-BART 6-5p,特别值得关注及研究。
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