克隆牙鲆形态、遗传特性以及温度对杂合克隆牙鲆生长发育影响的研究

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鱼类克隆是优质的遗传育种材料,在遗传学、发育生物学、生理学及环境毒理学等方面具有十分重要的科学价值和经济意义。克隆鱼类以其纯合性和个体间基因型的一致性为其主要特征,如果用于动物实验,可以消除群体内个体之间遗传上的差异影响,从而提高实验的准确性。杂合克隆是雌雄双单倍体或雌雄克隆杂交而成,虽然是杂合子,但个体间的基因型是一致的。本研究利用双单倍体诱导雌核发育获得克隆系,同时利用雌雄双单倍体杂交获得杂合克隆系,对克隆牙鲆的形态特征、遗传特性及温度对杂合克隆牙鲆性别分化、性比和生长的影响进行了研究。获得的主要结果如下:(1)牙鲆克隆系在形态特征上表现出高度相似性,全长/体长、全长/头长、全长/尾柄长、全长/体高、尾柄长/尾柄高以及体高/尾柄高等比例性状的变异系数分别为0.51%、1.67%、1.96%、1.76%、2.14%和2.00%,明显小于普通牙鲆(P<0.05)。(2)建立了克隆牙鲆和普通牙鲆120日龄的形态判别函数,分别为Y(Clone1)=21370.264X1+448.802X2+243.273X3-2035.533X4+4715.655X5-1087.834X6-12212.519Y(Control)=21196.452X1+464.518X2+246.094X3-2064.598X4+4745.065X5-1103.811X6-11989.084F检验结果表明,判别效果较好(P<0.01)。克隆牙鲆的形态判别函数对150日龄的克隆牙鲆依然适用,而普通牙鲆则不适用,需另行建立判别方程。(3)本研究利用重组率较高的24个微卫星标记对3个克隆家系进行基因分型,结果为各牙鲆克隆系的纯合度均达到100%,遗传相似度达到了1.0。(4)研究了在16℃、19℃、22℃、25℃、28℃和31℃下,水温对杂合克隆牙鲆性别分化、性比和生长影响。结果显示,性别分化与培育水温密切相关,16℃至28℃范围内,温度越高性别分化越快,31℃下,性腺发育停滞;通过组织切片统计性比,发现各温度下的杂合克隆牙鲆均为雌鱼,未发现雄鱼,表明高水温并没有促使杂合克隆雄性化,与高温对雌核发育牙鲆影响效果明显不同。其遗传机制尚待进一步研究。(5)水温对杂合克隆的生长具有极显著影响(P<0.01),除31℃外,其他各试验组随着水温升高而生长加快,25℃是生长最快的温度。该实验结果可供牙鲆育苗生产参考。
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