Pc-pis克隆自大黄鱼(Pseuudosciaena croceaa),是具有两亲性结构的海洋鱼类阳离子抗菌肽(Antimicrobial peptide,AMP),Pc-pis是Piscidins家族的成员,能杀死多种细菌、真菌和寄生虫,有一定的溶血活性。为了研究Pc-pis的抗癌作用以及融合蛋白,我们进行了一系列的探索。我们发现Pc-pis对多种癌细胞(Hela、HCT116、DU145、MCF7)有杀伤活性。比较有趣的是,适当大小的渗透压保护剂如PEG4000可以防止Pc-pis诱导Hela细胞的死亡。因此,我们推测Pc-pis与HeLa细胞的细胞膜相互作用,在膜上形成孔洞,进而导致癌细胞死亡。融合蛋白GFP-Pc-pis能够在Hela细胞的核膜上聚集,增加Pc-pis净正电荷会加强这种作用,增加净负电荷则作用相反。此外5个Piscidin家族或相关家庭成员中,三种肽显示了核膜定位,并具有抗肿瘤活性。以上结果证明了净正电荷对AMP和膜相互作用以及生物学功能的重要性。我们发现缩短和屏蔽Pc-pis的C端会使GFP-Pc-pis在核膜上聚集的现象消失,我们认为抗菌肽的完整和自由的C末端结构对其生物活性非常重要。我们还研究了原核表达的Pc-pis融合蛋白,虽然Pc-pis的细胞毒性阻碍了表达,但Pc-pis的C端进一步融合钙调蛋白(calmodulin,CaM)后,屏蔽了Pc-pis的细胞毒性,促进了融合蛋白的表达,此外在Pc-pis N端加上GST标签后也可以促进表达。接下来我们将以此为基础,通过Msln/MUC16相互作用体系构建相应的Pc-pis融合蛋白,靶向传递Pc-pis杀死癌细胞。为开发Pc-pis可能的临床应用提供理论基础。