【摘 要】
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在功能基因组研究中,获取各种基因功能的信息是一项重要任务。这种功能信息既包含该基因表达的蛋白产物的结构和生化特性方面的信息,以及该基因表达产物在具体的组织所具有功能的信息,又包含丧失该基因功能的生物体的表型信息。所以通过人工诱变的方法产生基因功能缺失的突变体,是研究基因功能的重要手段。作为一种脊椎动物模型,斑马鱼正逐渐受到广泛的关注。由于具有产卵量大,胚胎透明易于观察等优点,斑马鱼成为脊椎动物中最
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在功能基因组研究中,获取各种基因功能的信息是一项重要任务。这种功能信息既包含该基因表达的蛋白产物的结构和生化特性方面的信息,以及该基因表达产物在具体的组织所具有功能的信息,又包含丧失该基因功能的生物体的表型信息。所以通过人工诱变的方法产生基因功能缺失的突变体,是研究基因功能的重要手段。作为一种脊椎动物模型,斑马鱼正逐渐受到广泛的关注。由于具有产卵量大,胚胎透明易于观察等优点,斑马鱼成为脊椎动物中最好的诱变材料。本课题采用 ENU 诱变的方法,建立了 320 个斑马鱼 F2 突变体家系。通过对 F3 代胚胎的表型观察,鉴定了在外包、体轴、体节、头部、心血管系统等表现异常的突变体;通过原位杂交的方法,筛选了 dpr2,frb35 和胰岛素基因表达异常的突变体。表型观察法筛选了约 200 个 F2 家族,获得了 37 个突变品系,其中以体轴和体节发育异常的突变体为主,将其中 10 个品系保种,以备进一步研究。通过原位杂交的方法,获得一个 dpr2 基因表达异常的突变体 tipsy,该品系中的一部分突变体胚胎在原肠作用期就表现出背部中线向一侧随机倾斜,随后出现体轴扭曲、心脏定位紊乱等表型,说明这些突变体胚胎的左右平衡在早期发育中就被打乱。根据推测,tipsy 突变体品系可能涉及两个位点,需要通过大量的配种使它们分离。这些突变体品系为将来克隆突变基因、研究相关的发育机制打下了良好的基础。
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