GABA受体在重复经颅磁刺激抑制脊髓损伤后痉挛中作用机制的研究

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目的:探索GABA受体在重复经颅磁刺激(rTMS)缓解脊髓损伤后痉挛中的作用机制。通过建立SD大鼠脊髓重物撞击损伤模型,使用重复经颅磁刺激进行为期4周时间的治疗,观察大鼠痉挛恢复情况,同时观察γ-氨基丁酸(GABA)受体和钾氯离子共转运蛋白2(KCC2)的变化情况,从而推测GABA受体及KCC2蛋白在脊髓损伤后痉挛恢复中的作用。  材料与方法:选取体重在250-300g之间的SD雄性大鼠,随机分为如下几组:A、正常组,B、损伤组(脊髓损伤后7天组,脊髓损伤后14天组),C、rTMS治疗组(脊髓损伤7天后开始治疗组,脊髓损伤14天后开始治疗组)每组n=10。损伤组与治疗组均通过完整的重物撞击法(WD)建立不完全脊髓损伤模型。损伤组分别于造模后7天、14天处死取材进行检测;治疗组分别于造模成功7天后,14天后开始进行为期4周的治疗,治疗结束后处死取材进行检测。治疗组从造模成功开始至处死取材期间,每周使用BBB量表对大鼠运动功能评估一次。大鼠处死后分别取其大脑皮质、海马、小脑和脊髓腰骶膨大节段,使用western-blot和PCR等方法检测GABA受体及KCC2蛋白的含量变化。  结果:1、BBB评分:rTMS治疗组BBB评分显著高于脊髓损伤对照组(P<0.05),脊髓损伤7天后治疗组BBB评分显著高于脊髓损伤14天后治疗组(P<0.05);2、western-blot:治疗组KCC2蛋白、GABAA受体、GABAB受体含量显著高于脊髓损伤对照组,但低于正常对照组(P<0.05),脊髓损伤7天后治疗组KCC2蛋白、GABAA受体、GABAB受体含量显著高于脊髓损伤14天后治疗组(P<0.05);3、PCR:治疗组KCC2蛋白、GABAA受体、GABAB受体显著高于脊髓损伤对照组,但低于正常对照组(P<0.05),脊髓损伤7天后治疗组KCC2蛋白、GABAA受体、GABAB受体含量显著高于脊髓损伤14天后治疗组(P<0.05)。  结论:1、rTMS可以缓解大鼠脊髓损伤后痉挛,促进运动功能的恢复;2、rTMS可能通过调节抑制性受体GABA受体的表达而达到抑制痉挛的效果;3、rTMS抑制痉挛机制可能包含增强KCC2蛋白表达;4、脊髓损伤后rTMS的早期干预效果可能更佳。
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