黄原胶产生菌的筛选及发酵条件优化

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本论文针对如何提高黄原胶发酵产胶水平进行了研究。首先对产黄原胶的野油菜黄单胞菌A-1进行选育。出发菌株的黄原胶发酵产胶水平只有15.46g/L,通过紫外线诱变和遗传稳定性实验黄原胶发酵产胶水平达到了18.75 g/L,然后对紫外线诱变的菌株进行亚硝基胍诱变和遗传稳定性实验,得到黄原胶发酵产胶水平为21.63 g/L。黄原胶发酵产胶水平有明显的提高,得到的野油菜黄单胞菌菌株命名为A-2。在成功得到高产的菌株的基础上,研究了发酵培养基对黄原胶发酵产胶水平影响。通过单因素实验选择了玉米淀粉作为碳源,浓度为4.5%;豆饼粉作为氮源,浓度为0.5%。随后对发酵培养基进行了响应面实验,通过部分因子分析法研究发酵培养基各成分对响应值的影响程度,筛选出玉米淀粉和豆饼粉2个显著性因子,经最陡爬坡实验和中心组合实验确定玉米浓度和豆饼粉的浓度,得出玉米淀粉5.78%,豆饼粉0.52%时,黄原胶的发酵产胶水平达到27.32g/L。发酵条件对菌株生长及黄原胶发酵水平也有较高的影响。通过测定菌体在发酵液的OD600得出,菌体培养最佳条件为:pH值6.8,温度26℃,搅拌转速为180r/min,接种量为6%,生长周期为20h,接种时间为18h。通过单因素实验和正交实验得出黄原胶发酵的最佳条件为:pH值7.0,温度28℃,搅拌转速220 r/min,接种量6%。黄原胶发酵产胶水平达到29.5g/L。最后,本文还对黄原胶发酵液的后处理进行了研究。首先对发酵液进行预处理,将发酵液稀释1倍。一方面,通过硅藻土进行过滤,硅藻土的用量为10g/L,黄原胶的收率为93%。另一方面,通过酶降解法进行预处理得到,碱性蛋白酶的用量为100U/g,酶解温度为35℃,黄原胶的收率为98%。然后对预处理的发酵液进行醇析,采用95%的乙醇作为醇析的溶剂,醇用量为未处理发酵液的1倍,醇析的pH值为5.5。通过物化指标的测定得出,本实验得到的1%的黄原胶溶液的粘度为1516cp,剪切性能为7.15,含水量为9.2%,灰分为,黄原胶在水中溶解,加槐豆胶的黄原胶溶液中形成凝胶状物。
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