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目的黄地安消胶囊为安徽中医药大学第一附属医院治疗2型糖尿病（T2DM）的特色医院制剂。处方由枇杷叶、葛根、麦冬、生地等六味中药组成,临床应用多年,疗效确切,但其对胰岛素抵抗及其信号通路的作用尚不清楚。本课题旨在研究黄地安消胶囊对胰岛素IRS-1/PI3K/Akt/GSK-3β信号通路的调控作用,探讨其改善胰岛素抵抗可能的分子机制。方法1黄地安消胶囊对自发性T2DM模型GK大鼠IRS-1/PI3K/Akt/GSK-3β信号通路的调控作用GK大鼠尾静脉消毒后测血糖,以随机血糖大于11.1mmol/L作为T2DM模型成功的标准。取符合标准的大鼠随机分为模型组、参芪降糖颗粒（1.08 g/kg）组、黄地安消胶囊（12.0、6.0、3.0 g/kg）组,每组10只,另取10只Wistar大鼠为正常对照组。各组给药6周后,测定大鼠的空腹血糖（FBG）、随机血糖（RBG）、血清胰岛素含量（FINS）、空腹血清血糖（FPG）、胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）、并进行糖耐量试验（OGTT）;对血脂（TC、TG、LDL-C）、糖化血红蛋白（HbA1c）、胰高血糖素样肽-1（GLP-1）、胰岛素样生长因子（IGF-1）进行测定。HE染色观察胰腺和肝组织病理形态的改变,PAS染色观察肝糖原合成的情况。RT-qPCR检测INSR,IRS-1、PI3K、Akt、GSK-3β和GS的mRNA表达水平,Western bolt（WB）检测INSR、p-IRS-1、PI3K、p-Akt、p-GSK-3β和GS蛋白的表达水平,免疫荧光技术检测p-IRS-1、PI3K、p-Akt、p-GSK-3β蛋白的表达。2黄地安消胶囊含药血清对高糖高胰岛素诱导的HepG2细胞IRS-1/PI3K/Akt/GSK-3β信号通路的调控作用采用DMEM培养基培养HepG2细胞于5%CO2,37℃恒温培养箱中,用高糖高胰岛素诱导HepG2细胞复制胰岛素抵抗模型,MTT法筛选出黄地安消胶囊最佳含药血清浓度和作用时间。将HepG2细胞分为正常组、高糖高胰岛素刺激组、高糖高胰岛素刺激+含药血清组。采用RT-qPCR检测INSR、IRS-1、PI3K、Akt、GSK-3β、GS mRNA的表达,Western blot检测INSR、p-IRS-1、PI3K、p-Akt、p-GSK-3β和GS蛋白的表达,免疫荧光技术检测INSR、p-IRS-1、PI3K、p-Akt、p-GSK-3β和GS蛋白表达。结果1黄地安消胶囊对自发性T2DM模型GK大鼠IRS-1/PI3K/Akt/GSK-3β信号通路的调控作用与模型组相比,黄地安消胶囊高、中剂量组GK大鼠FBG、FPG、RBG、HOMA-IR、TG、TC、LDL-C、AUC明显降低;GLP-1,IGF-1表达量增加,胰腺和肝脏组织结构改变明显减轻。同时上调INSR、IRS-1、PI3K、Akt和GS mRNA,下调GSK-3βmRNA;增加INSR、p-IRS-1、PI3K、p-Akt和GS蛋白的表达,降低p-GSK-3β蛋白表达。2黄地安消胶囊含药血清对高糖高胰岛素诱导的HepG2细胞IRS-1/PI3K/Akt/GSK-3β信号通路的调控作用MTT实验筛选出10%浓度含药血清,作用48h,细胞活性较高。此时,黄地安消胶囊可显著上调INSR、IRS-1、PI3K、Akt和GS mRNA,下调GSK-3βmRNA;增加INSR、p-IRS-1、PI3K、p-Akt和GS蛋白的表达,降低p-GSK-3β蛋白表达。结论1黄地安消胶囊对糖尿病GK大鼠血糖、胰岛素抵抗、IRS-1/PI3K/Akt/GSK-3β信号通路蛋白表达存在调节作用2黄地安消胶囊调控IRS-1/PI3K/Akt/GSK-3β信号通路蛋白活性,降低葡萄糖含量,增加糖原合成,可能是其改善胰岛素抵抗的作用机制之一