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目的：神经系统是一个功能和结构都较为复杂的系统，神经系统疾病的种类和临床表现也复杂多变，已有研究证明，细胞凋亡在神经系统相关疾病中发挥着重要作用。近几年的研究发现，miR-15a参与调控神经系统功能，进而影响神经系统的发育和相关疾病的发生，但其具体作用机制尚不明确，尤其在分子水平的研究更为少见。大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC-12)在神经生长因子的诱导作用下可以分化成为交感神经元样细胞，使其在功能和形态上类似于神经细胞。因此我们以PC-12细胞作为神经系统体外模型，通过转染人工合成的rno-miR-15amimic，观察转染后细胞中Bcl-2的表达变化和对细胞凋亡的影响，探讨miR-15a是否是通过调控Bcl-2来影响PC-12细胞的凋亡及其可能的分子机制，为凋亡相关的神经系统疾病的诊治提供重要的理论依据。 方法：应用神经生长因子(NGF)对未分化型PC-12细胞进行诱导以构建体外神经细胞模型，再将人工合成的rno-miR-15a mimic转染至分化型PC-12细胞中，通过实时荧光定量PCR检测基因的转染情况，进一步应用实时荧光定量PCR(RT-PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测基因转染后Bcl-2的表达变化，并利用流式细胞仪检测细胞的凋亡情况。 结果：⑴使用终浓度为50μg/L的神经生长因子(NGF)溶液对未分化型PC-12细胞进行诱导分化，72小时后在倒置显微镜下观察细胞形态变化，发现细胞体积明显增大、出现多个长短不等的细胞突起、细胞之间相互交错连接成网状。细胞发生了神经元样改变，成功地将未分化型PC-12细胞诱导成为分化型PC-12细胞，建立了体外神经细胞模型。⑵对转染Negative control的细胞(Nc组)和转染rno-miR-15a-5P mimic的细胞(Mimic组)进行实时荧光定量PCR测定基因的转染情况发现，Mimic组的细胞中miR-15a表达明显增多，并且两者的差异具有统计学意义(P＜0.05)。成功建立了miR-15a过表达的体外神经细胞模型。⑶实时荧光定量PCR检测基因转染后的各组细胞中Bcl-2 mRNA的表达，结果显示:与转染Negative control细胞（Nc组）相比，转染rno-miR-15a-5P mimic的细胞（Mimic组）中Bcl-2基因的表达量减少，且两者差异具有统计学意义(P＜0.05)，提示分化型PC-12细胞中miR-15a表达增多可能抑制Bcl-2基因的表达。⑷蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组细胞中Bcl-2蛋白的表达结果发现:与正常对照组（空白组）比较，转染Negative control(Nc组)的PC-12细胞中Bcl-2蛋白表达量降低，为正常对照组细胞表达量的86％，且两者差异具有统计学意义(P＜0.05);与正常对照组（空白组）相比，转染rno-miR-15a-5Pmimic(Mimic组)的PC-12细胞中Bcl-2蛋白表达量明显降低，为正常对照组细胞表达量的57％，两者差异具有统计学意义(P＜0.05)。与转染Negative control细胞(Nc组)相比，转染rno-miR-15a-5P mimic(Mimic组)的PC-12细胞的Bcl-2蛋白表达量明显减少，为Nc组细胞表达量的67％，并且两者的差异具有统计学意义(P＜0.05)，提示miR-15a过表达可能抑制分化型PC-12细胞中Bcl-2蛋白的表达。⑸AnnexinⅤ-FITC/PI流式细胞凋亡试剂盒检测细胞的凋亡率，结果显示:与空白组（正常对照）细胞相比，Nc组（转染Negative control）PC-12细胞的凋亡率增加，两者差异具有统计学意义(P＜0.05);与空白组细胞相比，Mimic组（转染rno-miR-15a-5P mimic）PC-12细胞的凋亡率增多，两者的差异具有统计学意义(P＜0.05)。与Nc组相比，Mimic组PC-12细胞的凋亡率增加，并且两者的差异具有统计学意义(P＜0.05)，提示miR-15a过表达可能诱导PC-12细胞的凋亡。 结论：①miR-15a过表达对PC-12细胞具有损伤作用，可以增加细胞的凋亡。②miR-15a可能通过抑制Bcl-2的表达来参与调控PC-12细胞的凋亡行为。