脑外伤是临床上的一类多发病，常引起严重的神经功能障碍。中枢神经可塑性与脑外伤后的脑功能恢复密切相关。哺乳动物成熟中枢神经系统损伤后缺乏有效再生，目前倾向于将其归结于损伤部位的生理、生化和分子生物学环境的改变。这些因素包括生长促进因子的缺乏、损伤部位疤痕的形成、生长抑制分子的存在、离断神经元的轴突溃变和损伤所促成的内外源性理化因素改变等。近年来的研究显示，如能有效阻断神经生长抑制因子和提高神经生长促进因子的作用，可明显促进损伤后的中枢神经再生。 作用于CNS的生长抑制分子包含细胞外基质蛋白如semaphorin3A，硫酸软骨素蛋白粘多糖（CSPG）和髓鞘相关蛋白如Nogo-A，髓鞘相关糖蛋白（MAG），少突胶质细胞髓鞘糖蛋白（OMgp）。其中Nogo-A的作用最为关键。它可能作为一种多功能的信号分子在诸如轴突外向性生长，细胞的存活或死亡的判定以及突触的可塑性这种种功能中起作用。因此，Nogo-A与成年哺乳动物CNS损伤后的轴突再生和代偿塑性的限制作用有关。 GAP-43（又名B-50，F1，神经调素）是生长相关蛋白（GAPs）家族中的重要的一员，为神经组织特有的一种磷酸蛋白，特异性分布于突触前膜上，特别是在生长、分化及再生的轴突末端含量最高，对神经的生长、发育、再生以及突触功能的维持和递质的释放都起着重要作用。GAP-43被认为是神经元生长期的内在决定因子，可作为神经再生的标志。 目的：本实验观察神经生长抑制因子Nogo-A及促生长因子GAP-43在小鼠实验性weigh-drop brain injury后损伤灶周不同时点表达的变化，探讨Nogo-A及GAP43在weigh-drop brain injury后对神经再生的作用。 方法：利用weigh-drop brain injury脑撞击装置，复制外伤性脑撞击伤小鼠模型，采用实时荧光定量PCR技术，在小鼠外伤性脑损伤后第1、7、14和28天分别检测损伤灶周大脑皮层Nogo-A及GAP-43的表达量，同时用免疫组织化学技术观察Nogo-A及GAP-43在大脑皮层的阳性信号，来印证荧光定量PCR结果。 结果： 一．脑撞击伤后小鼠大脑皮层Nogo-AmRNA的表达（荧光定量） 荧光定量PCR显示：手术组Nogo-A的相对值（Nogo-A的拷贝数/18SrRNA的拷贝数）在第1天为0．61±0．15，较假手术组0．99±0．13明显降低；脑撞击伤后第7、14和28天分别为1．44±0．33、1．78±0．22、1．40±0．85，均较假手术组相应时相点1．00±0．21、1．19±0．20、1．01±0．34明显升高。手术组Nogo-A mRNA表达第1天先下降，后呈上升趋势，第14天达到高峰，第28天下降，但高于假手术组，手术组之间相比有显著性差异。假手术组组间没有差异，说明开颅而不损伤脑组织对Nogo-A mRNA的表达几乎没有影响。 二．脑撞击伤后小鼠大脑皮层GAP-43mRNA的表达（荧光定量） 荧光定量PCR显示：手术组的GAP-43的相对值（GAP-43的拷贝数/18SrRNA的拷贝数）在第1、7天分别为1．30±0．15、1．88±0．22，均较假手术组相应时间点0．91±0．08、1．02±0．12明显升高；脑撞击伤后第14天为1．31±0．15，较假手术组同时相应点0．98±0．16明显升高；脑撞击伤后第28天为1．02±0．15，与假手术组同时相点1．06±0．10相比无明显差异。手术组GAP-43mRNA表达在脑损伤后逐渐上升，第7天达到高峰，然后逐渐下降，第28天降至假手术组水平，手术组之间比较有显著差异。假手术组之间比较没有明显差异，说明开颅而不损伤脑组织对GAP-43 mRNA的表达没有影响。 三．脑撞击伤后小鼠大脑皮层Nogo-A表达（免疫组化） 免疫组化结果显示，Nogo-A表达于皮层及皮层下的胶质细胞及神经元的胞浆。阳性信号呈棕黄色条索状神经纤维髓鞘以及有突起的神经元形态。Nogo-A的阳性信号值在第1天为0．07±0．01，较假手术组0．11±0．01明显降低；脑撞击伤后第7、28天分别为0．13±0．02、0．14±0．02，均较假手术组相应时相点0．09±0．01、0．10±0．01明显升高；脑撞击伤后第14天为0．19±0．02，较假手术组0．10±0．01明显升高。手术组Nogo-A含量第1天先下降，后呈上升趋势，第14天达到高峰，第28天下降，但高于假手术组，手术组之间相比有显著性差异。假手术组组间没有差异，说明开颅而不损伤脑组织对Nogo-A的表达几乎没有影响。 四．脑撞击伤后小鼠大脑皮层GAP-43表达（免疫组化） 免疫组化结果显示，GAP-43表达于皮层及皮层下神经元细胞的突起。阳性信号呈棕黄色有突起的神经元形态。手术组的GAP-43的阳性信号值在第1、14天分别为0．24±0．01、0．25±0．01，均较假手术组相应时间点0．10±0．01、0．09±0．02明显升高；脑撞击伤后第7天为0．53±0．02，较假手术组同时相应点0．11±0．01显著升高；脑撞击伤后第28天为0．13±0．01，与假手术组同时相点0．12±0．01相比无明显差异。手术组GAP-43阳性值信号逐渐上升，第7天达到高峰，第28天降至假手术组水平，手术组之间比较有显著差异。假手术组之间比较没有明显差异，说明开颅而不损伤脑组织对GAP-43的表达没有影响。 结论： 1．外伤性脑损伤损伤灶周围大脑皮层Nogo-A mRNA及蛋白表达量增加。损伤后第1天Nogo-A mRNA及蛋白表达量稍下降，然后逐渐升高，第7天时升高明显，第14天达到高峰，继之逐渐下降。第28天时仍有较高的表达。 2．外伤性脑损伤损伤灶周围大脑皮层GAP-43 mRNA及蛋白表达量增加。损伤后第1天GAP-43 mRNA及蛋白表达即升高，第7天达高峰，然后逐渐下降，第14天时仍有较高表达，第28天时表达接近正常水平。 3．外伤性脑损伤损伤灶周围大脑皮层Nogo-A及GAP-43的表达增加。它们可能共同参与成年哺乳动物脑损伤后CNS神经可塑性的调节，但显示的可能是一种总的抑制性效应。这或许是成年哺乳动物脑损伤后CNS神经恢复障碍的重要原因之一。