目的：⑴检测KLK4在正常子宫内膜、增生性子宫内膜、子宫内膜癌组织中的表达，探讨其与子宫内膜癌的关系。⑵检测KLK4在子宫内膜癌细胞株RL95-2，KLE中的表达，并以类固醇激素(雌激素、孕激素)和它莫昔芬处理细胞，探讨类固醇激素对子宫内膜癌中KLK4的调控。⑶探讨在子宫内膜癌细胞中雌激素调控KLK4的信号通路。⑷探讨KLK4对子宫内膜癌细胞增殖和凋亡的影响及作用机制。 方法：①应用实时定量逆转录聚合酶链反应(realtime RT-PCR)，和免疫组织化学方法检测KLK4 mRNA和蛋白在正常子宫内膜、增生性子宫内膜、子宫内膜癌组织中的表达，并比较它们之间的表达差异及其在子宫内膜癌临床价值。②应用real-time RT-PCR和Western blot方法检测KLK4 mRNA和蛋白在RL95-2，KLE中的表达变化，观察不同表型子宫内膜癌细胞中KLK4对不同药物处理后的反应。③对子宫内膜癌细胞RL95-2、KLE两种不同ER状态的细胞给予不同浓度的雌激素(17-βE2)处理，采用real time RT-PCR及westernblot方法分别检测两种细胞中KLK4 mRNA的表达变化；western blot分析17-βE2处理后的两种内膜癌细胞内MAPK/ERK1/2以及PI3K/Akt信号通路的变化，同时应用PI3K抑制剂LY294002和MAPK抑制剂U0126联合17-βE2处理细胞后观测两种细胞中两条信号通路与KLK4蛋白表达的相关性。④采用real time RT-PCR和细胞免疫化学方法分别检测两种子宫内膜癌细胞系RL95-2和KLE细胞中KLK4的表达差异；采用RNA干扰技术，特异性敲除RL95-2中KLK4的表达，以流式细胞术分别检测RNA干扰后子宫内膜癌细胞RL95-2的细胞周期和凋亡变化并检测KLK4敲除后细胞周期与凋亡相关基因的表达变化。 结果：⑴KLK4 mRNA在正常子宫内膜、增生子宫内膜和子宫内膜癌组织中均有表达。KLK4 mRNA在子宫内膜癌组织中的表达水平显著高于增生子宫内膜和正常子宫内膜组织(P<0.05)。⑵KLK4蛋白在子宫内膜癌组织中的表达水平显著高于增生性子宫内膜和正常子宫内膜组织(P<0.01)。⑶KLK4蛋白在子宫内膜癌细胞中的表达部位主要位于细胞核内，KLK4与子宫内膜癌手术病理分期无关(P=0.382)，但与组织分化程度相关(P<0.05)；在正常子宫内膜组KLK4的表达强度虽无明显差异(P=0.253)，但在增殖期内膜中KLK4的表达有上调趋势；KLK4表达强度与ER受体状态无关(P=0.594)。⑷real-time RT-PCR和western blot结果显示，雌激素上调RL95-2和KLE细胞中KLK4的表达，以17-βE2浓度在10-10和10-8mol/L时上调作用最为明显(P<0.01)，10-12mol/L浓度时上调作用与对照组无明显差异(P>0.05)；MPA处理组显示KLK4的下调表达，差异有显著性(P<0.05)；TAM处理组KLK4的相对表达含量与对照组无显著变化(P>0.05)。⑸两种不同ER受体状态的子宫内膜癌细胞中雌激素均不同程度的上调KLK4 mRNA的表达；雌激素能激活两种细胞中PI3K/Akt和MAPK/ERK1/2信号通路，雌激素对于KLK4的上调作用被MAPK/ERK1/2信号通路抑制剂U0126阻断，而PI3K/Akt抑制剂不能阻断雌激素对于KLK4的表达调控。⑹子宫宫内膜癌细胞株RL95-2中KLK4表达明显强于KLE细胞。⑺以RL95-2细胞为平台特异性对KLK4 mRNA干扰后，流式细胞术结果显示RL95-细胞空白组、阴性对照组及干扰组处于S期的细胞比例分别为39.26±0.69％，39.20±0.79％，23.36±0.86％和17.78±0.35％，四组比较差异有显著性(P<0.05)；细胞周期相关基因PCNA、cyclin D1和RB明显下调，而cyclin E无明显变化趋势。⑻Annexin V和PI双染细胞凋亡检测显示上述四组细胞处于早期凋亡的细胞比例分别为4.67±1.31％、4.30±1.2％、14.75±2.31％和22.28±2.48％，四组比较差异有显著性(P<0.01)，细胞凋亡抑制相关基因Bcl-2明显下调，而作为凋亡促进基因的Bax表达上调，凋亡效应子caspase3，8活化程度增强。 结论：①KLK4在子宫内膜癌中过度表达，其定位于内膜癌细胞核内；表达强度与癌细胞的分化程度有关，与雌激素受体无关。提示KLK4对内膜癌的发生及细胞表型转化过程有较为重要价值。②雌、孕激素对于两种不同ER状态的子宫内膜癌细胞株中KLK4的表达有调控作用，雌激素上调作用与细胞ER状态无关，提示雌激素可能通过非经典核内受体调控模式影响子宫内膜癌的发生发展。③雌激素促进了子宫内膜癌细胞株RL95-2和KLE中KLK4的表达上调，其上调途径与ER状态无关；雌激素调控子宫内膜癌细胞KLK4的表达是通过MAPK信号通路介导的，这是一种雌激素非ER依赖的调控模式。④KLK4特异性敲除后能促进子宫内膜癌细胞的凋亡及使子宫内膜癌的细胞周期发生阻滞，提示KLK4与子宫内膜癌细胞的凋亡和增殖相关，这种生物学行为可能是KLK4通过调控细胞周期与凋亡相关基因实现的。