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随着我国树莓的种植不断增多,树莓病害的发生也日益严重,造成减产和经济损失。本实验室2016-2017年对辽宁中部地区树莓园进行了病害调查,通过与以往研究结果比较发现了4种新病害。本研究针对4种新病害进行了病原菌分离纯化、回接测定、形态学鉴定与分子系统发育鉴定,并在此基础上开展了病原菌生物学特性、室内抑菌测定和品种抗病性评价,具体研究结果如下:1.经鉴定四种树莓新病害分别由Pestlotiopsis adusta、Neopestalotiopsis megna、Alternaria sp.和A.tenussima引起。四种新病害的病样采集分离和纯化结果表明,每个病害均获得菌落表型一致的分离物,分别从中挑选一株作为代表菌株,并进行编号。菌株SNHS03Kd主要为害树莓叶片,病斑形状不规则,深棕色,大小约为0.31.2cm。其菌落（PDA,25℃,10 d）白色至橘黄色,无明显轮纹,分生孢子大小为16.722.4μm×4.76.6μm,顶端附属丝23根,长度7.8μm13.2μm。采用ITS、β-tubulin和EF-1α三段基因联合（国际通用拟盘多毛孢属种级别分子鉴定方法）进行系统发育分析。结合形态学与分子鉴定的结果,菌株SNHS03Kd鉴定为Pestalotiopsis adusta。菌株SNHS12B主要为害树莓叶片,病斑形状近椭圆形,灰白色,大小约为0.50.8cm。其菌落（PDA,25℃,10 d）白色,有明显轮纹,分生孢子大小为39.744.9×9.111.6μm,分生孢子顶端附属丝24根,长度为19.336.2μm用ITS、β-tubulin和EF-1α三段基因联合（国际通用拟盘多毛孢属种级别分子鉴定方法）进行系统发育分析。结合形态学与分子鉴定的结果,菌株SNHS12B鉴定为Neopestalotiopsis megna。菌株SNHS06A主要为害树莓叶片,病斑形状近椭圆形,棕色,产生黄色晕圈。其菌落（PDA,25℃,7 d）白色,分生孢子大小为24μm39μm×7.1μm12.6μm。该菌株的ITS基因经NCBI比对分析,发现其与A.tenussima相似度达98%,确定其为小孢子链格孢种类。采用Histone-3基因对该菌株和A.tenussima近缘种进行系统发育分析,结果表明该菌株SNHS06A存在种间交叉现象,需要进行后续研究。菌株SNHS21B主要为害树莓茎部,病斑呈梭形,边缘红棕色,中心灰白色,大小为12 cm。其菌落（PDA,25℃,7 d）青褐色,分生孢子大小为13μm45μm×6.4μm10.8μm。该菌株的ITS基因经NCBI比对分析,发现其与A.tenussima相似度达100%,确定其为小孢子链格孢种类。采用Histone-3基因对该菌株和A.tenussima近缘种进行系统发育分析。结合形态学与分子鉴定结果,菌株SNHS21B鉴定为A.tenussima。2.四种新病害病原菌的生物学特性研究本研究分别测定了4种供试病原菌在5种碳源、5种氮源、5种培养基、6个温度和3种光照条件下的生物学特性。结果表明,四株代表菌株的最适碳源、最适培养基、最适温度及光照条件表现一致。最适碳源为麦芽糖;最适培养基为PDA;最适温度为25℃;对光照条件不敏感。四株代表菌株的最适氮源条件有所差异,两种拟盘菌（P.adusta和N.megna）的最适氮源为甘氨酸;两种链格菌最适氮源出现分化现象,菌株SNHS06A（Alternaria sp.）的最适氮源为NaNO3;菌株SNHS21B（A.tenussima）的最适氮源为半胱氨酸。3.六种杀菌剂对四种新病害病原菌的室内抑菌效果测定本研究以四种新病害病原菌作为靶标,分别测定了6种杀菌剂（甲基硫菌灵、双胍三辛烷基苯磺酸盐、吡唑醚菌酯、异菌脲、咯菌腈和苯甲嘧菌酯）的室内抑菌效果。结果表明,咯菌腈和苯甲嘧菌酯对四种新病害的抑菌效果最好,其EC50值均小于0.15μg/ml。异菌脲和吡唑醚菌酯对拟盘多毛孢属真菌抑菌效果较好,但对链格属真菌抑菌效果较差。双胍三辛烷基苯磺酸盐和甲基硫菌灵对P.adusta抑菌效果较好,但对N.megna和链格属真菌抑菌效果较差。4.十个树莓品种对树莓叶斑病的抗病性差异研究本研究对树莓10个品种（秋萍、秋福、金秋、町康、顶峰、H1、75号、0号、76号、77号）进行了抗病性评价,结果表明:10个品种对新发现的3种树莓叶斑病抗病性差异显著。接种5 d时,对菌株SNHS03Kd（P.adusta）相对抗病的供试品种有4种（町康、H1、金秋和0号）,对其感病的品种有4种（顶峰、秋萍、76号和77号）;对菌株SNHS12B（N.megna）相对抗病的供试品种有3种（75号、76号和金秋）,对其相对感病的品种有2种（H1和顶峰）;对菌株SNHS06A（Alternaria sp.）相对抗病的供试品种有2种（町康和金秋）,对其相对感病的品种有2种（76号和77号）。综上所述,金秋和町康2个品种对这三种新叶斑病的抗病性相对较强。