本实验主要是采用聚合酶链式反应的方法构建含日本血吸虫Sj14(FABP）基因和Sj26(GST)基因的重组质粒pBCG-Sj14-Sj26（这是个原核穿梭双表达重组质粒），然后检测它在耻垢分枝杆菌中的表达情况。主要是以实验室构建完成的pMD-Sj14,pMD-Sj26 为模板，扩增得到Sj14(FABP）和Sj26(GST)这两个基因。随后将这两个基因克隆到原核穿梭表达载体pBCG-SP中，即得到重组质粒pBCG-SP-Sj14和pBCG-SPSj26。接着分别以pBCG-SP-Sj14和pBCG-SP-Sj26 质粒为模板，采用聚合酶链式反应技术扩增出含SD 序列和原核信号肽编码序列在内的Sj14和Sj26 修饰基因SP-Sj14和SP-Sj26。将上述两个基因一起克隆到pBCG2100中，最终得到重组质粒pBCG-Sj14-Sj26，最后利用电穿孔的方法将该质粒转入耻垢分枝杆菌中，经热诱导后，利用SDS-PAGE和Western-blot 来检验Sj14和Sj26的表达和生物学活性。　　 最后的结果通过PCR鉴定和证酶切鉴定，来确定pBCG-SP-Sj14、pBCG-SP-Sj26以及pBCG-Sj14-Sj26 质粒构建成功。并且重组质粒pBCG-Sj14-Sj26 成功的转入耻垢分枝杆菌中。通过SDS-PAGE 检验出Sj14和Sj26的表达，并且利用Western-blot 可检测出表达产物能与Sj26 抗体发生特异性的结合。　　 最终得出结论成功构建了日本血吸虫原核穿梭表达质粒pBCG-Sj14-Sj26，该质粒经电转入耻垢分枝杆菌后可高效表达Sj14和Sj26 蛋白，并且表达的Sj26 蛋白具有生物学活性。为下一步日本血吸虫重组BCG 疫苗的研制奠定了基础。