内含子介导的基因增强效应（intron-mediated enhancement，IME）自1987年在玉米中发现以来，内含子在基因表达中的作用受到了研究者的高度重视，人们发现IME在真核生物（脊椎动物，无脊椎动物，真菌和植物）中广泛存在，并且发现越来越多的内含子具有增强基因表达的能力。尽管IME机制尚不明确，但大量研究表明内含子增强效应具有一些显著的特征，为内含子作为基因表达调控元件的应用奠定了基础。内含子中可能存在一定的剪接调控基序，这些基序在内含子介导的增强效应中发挥重要作用，玉米ubiqutin基因的第1个内含子（ubi1）可以有效提高外源基因的表达水平（可以提高报告基因表达5倍以上）。在本研究中，首先通过对ubi内含子缺失分析，获得了八个内含子缺失片段，并构建了pSG（13i-P1）N、pSG（13i-P2）N、pSG（13i-P3）N、pSG（13i-P4）N、pSG（13i-P5）N、pSG（13i-P6）N、pSG（13i-A）N和pSG（13i-B）N八个瞬时表达载体，并通过基因枪转化玉米愈伤组织，验证报告基因gus的表达特征，发现ubi1的3’末端位置缺失比5’末端缺失更能影响内含子的增强效应，并且发现P5内含子片段较全长ubi1更能提高外源基因的表达；进一步对P5内含子进行相应的点突变，获得了pSG（13i-M1）N（或pSG（13i-M78）N）、pSG（13i-M2）N、 pSG（13i-M3）N、 pSG（13i-M5）N pSG（13i-M11）N、 pSG（13i-M282）N和pSG（13i-M510）N七个内含子突变瞬时表达载体，通过基因枪转化玉米愈伤组织，分析gus基因表达特征，发现ubi1中的突变位点与内含子增强效应直接相关，不同位点的突变在基因表达中的效果不同，其中pSG（13i-M5）N载体增强效应更加明显，由此获得了改造的P5和M5新型内含子，它们的增强效应均高于ubi1。进一步建立了在多种单子叶植物转化中通用的含有内含子的载体模型-pSAinGN和pSA12inGN，获得了pSAiGN（含全长ubi1）、pSAP5GN、pSAM5GN、pSA12iGN、pSA12P5GN和pSA12M5GN六个通用表达载体，基因枪转化法分别转化玉米和水稻的愈伤组织，结果显示，六个通用载体在玉米和水稻的愈伤组织中均体现出了增强效应，并且在这两种材料中表达特征非常相似，这暗示了ubi1内含子在单子叶植物中介导的外源基因增强效应的保守性，为转基因作物研究提供一个新型调控元件。