荧光分析实验方法的建立及在生物产品分析中的应用

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本实验分析了荧光分析的原理、特点以及在药物含量检测和蔬菜中亚硝酸根残留分析中的应用,并分别对维生素B2进行了荧光分析研究,对亚硝酸根进行了催化荧光分析研究。分析了维生素B2标准品的激发波长和发射波长的扫描,选择并确定了最佳波长。研究了维生素B2荧光分析的实验条件,简化了预处理的过程,减少了实验药品的用量,并达到了方法简便快捷,分析结果较好,精确度较高的目的;通过正交试验确定了测定维生素B2的最佳实验条件和影响因素的强弱顺序,证明了测定时间是荧光分析维生素B2中最大的影响因素。维生素B2在激发波长λex=490.0nm和发射波长λem=512.0nm时,回收率可达到96.58~100.37%,变异系数可控制在0.10%以内。采用正交试验法,得出最佳测定结果为:溶液放置时间为45min、测量温度为12℃和光线强度为暗光。三个因素对维生素B2测定的影响顺序分别为测量时间>温度>光线强度。亚硝酸根可以催化中性红的荧光退色反应,且亚硝酸根的含量和退色反应的速率成正比。通过单因素实验分析了各个实验条件的选择,并用均匀试验优化了实验条件,确定出了最佳的影响因素组合。通过马铃薯和洋葱两种根茎类植物中亚硝酸盐残留的测定,可以得出蔬菜的表皮中也含有亚硝酸盐,但含量不是很大。采用本法测定蔬菜中亚硝酸根的残留,在激发波长λex=537.0nm和发射波长λem=595.0nm下变异系数为6.5%,平均回收率可达到100.2%。
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